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葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选
引用本文:郭大龙,张君玉,李猛,张国海,刘崇怀.葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选[J].基因组学与应用生物学,2010,29(2).
作者姓名:郭大龙  张君玉  李猛  张国海  刘崇怀
作者单位:1. 河南科技大学林学院,洛阳,471003
2. 中国农业科学院郑州果树研究所,郑州,450009
基金项目:国家自然科学基金,河南省教育厅自然科学研究计划项目,葡萄行业科技,国家葡萄产业技术体系 
摘    要:本试验利用L16(45)正交试验设计探寻葡萄SRAP-PCR反应体系中的关键因子,同时结合单因素试验简单、快捷的特点逐个对PCR反应体系的主要成分进行优化.充分利用两种方法的优点并降低试验工作量取得了较好的效果,建立了适于葡萄的SRAP反应体系.结果表明Mg2+浓度为影响葡萄SRAP-PCR反应的关键因素:优化的20 μL SRAP-PCR反应体系中各组分的最适含量为:10×Buffer 2.0μL,Mg2+2.5mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,引物0.4 μmol/L,DNA聚合酶1.0 U,模板DNA 1.0 ng/L.利用SRAP反应体系,从100对SRAP引物组合中筛选出扩增稳定,条带清晰,多态性好的引物19对.本研究建立的适于葡萄SRAP-PCR扩增的反应体系,将为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建,分子标记辅助育种和遗传改良研究提供基础.

关 键 词:葡萄  体系优化  引物筛选

Optimization of SRAP-PCR System in Grape and Primers Screening
Guo Dalong,Zhang Junyu,Li Meng,Zhang Guohai,Liu Chonghuai.Optimization of SRAP-PCR System in Grape and Primers Screening[J].Genomics and Applied Biology,2010,29(2).
Authors:Guo Dalong  Zhang Junyu  Li Meng  Zhang Guohai  Liu Chonghuai
Abstract:
Keywords:SRAP
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