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| 油菜叶绿体多顺反子定点整合表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 李文品,廖玉才,黄涛,李和平.油菜叶绿体多顺反子定点整合表达载体的构建[J].基因组学与应用生物学,2012,0(5):460-466. |
| 作者姓名： | 李文品 廖玉才 黄涛 李和平 |
| 作者单位： | 1. 华中农业大学生命科学技术学院, 武汉, 430070 2. 华中农业大学麦类作物分子生物技术实验室, 武汉, 430070 3. 华中农业大学植物科学技术学院, 武汉, 430070 |
| 基金项目： | 科技部中德合作项目(2009DFA32330);“863”国家高技术研究发展专项(2007AA100505)共同资助 |
| 摘 要： | 根据拟南芥叶绿体基因组序列设计PCR引物,从我国甘蓝型油菜栽培品种F4叶绿体基因组中克隆了长度为1.5kb的trnI和trnA2个基因序列,核酸序列分析表明它们与拟南芥基因的同源性高达94%和99%,这两个克隆的油菜叶绿体基因组序列trnI和trnA被用于构建叶绿体定点整合表达载体。利用烟草叶绿体基因强启动子Prrn和终止子TpsbA,以及筛选标记基因aadA和目的基因HSA,构建了多顺反子表达盒Prrn-aadA-HSA-TpsbA,将表达盒置于油菜叶绿体trnI和trnA序列之间,最后构建成油菜叶绿体多顺反子定点整合表达载体pIPaHTA。酶切鉴定及序列分析证实,构建的表达载体具有预期的调控元件及结构,这为后期油菜叶绿体转化体系的建立奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 油菜(Brassica napus) 叶绿体 同源重组 多顺反子表达载体 |
Construction of A Polycistronic Expression Vector for Site-Specific Integration into Rapeseed Chloroplast |
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| Li Wenpin,Liao Yucai,Huang Tao,Li Heping.Construction of A Polycistronic Expression Vector for Site-Specific Integration into Rapeseed Chloroplast[J].Genomics and Applied Biology,2012,0(5):460-466. | |
| Authors: | Li Wenpin Liao Yucai Huang Tao Li Heping |
| Institution: | 1,2 1 College of Life Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan, 430070; 2 Molecular Biotechnology Laboratory of Triticeae Crops, Huazhong Agricultural University, Wuhan, 430070; 3 College of Plant Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan, 430070 |
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