| 不同激活方法对水牛ICSI介导转基因效果的影响 |
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| 引用本文： | 陈自洪,韦珏,孟凡丽,陆凤花,崔奎青,石德顺.不同激活方法对水牛ICSI介导转基因效果的影响[J].基因组学与应用生物学,2012,31(4):355-359. |
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| 作者姓名： | 陈自洪 韦珏 孟凡丽 陆凤花 崔奎青 石德顺 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室,南宁,530004;广西壮族自治区人口和计划生育研究中心,南宁,530021
2. 广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室,南宁,530004 |
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| 基金项目： | 本研究由国家高技术研究发展计划(863)项目，国家转基因重大专项，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 本研究探讨了不同激活方法对水牛ICSI介导转基因效果的影响。水牛体外成熟卵进行ICSI介导转基因(ICSI-mediated gene transfer,ICSI-Tr)操作后,先用5μmol/L的离子霉素(ionomycin,Ion)激活处理5min,然后分成3组,再分别用10μg/mL放线菌酮(cycloheximide,CHX)培养5h(CHX5h组)、10μg/mLCHX培养3h后再用2mmol/L的二甲氨基嘌呤(6-DMAP)培养2h(CHX3h-DMAP2h组)或用培养液(CM)培养3h后再用2mmol/L6-DMAP培养2h(CM3h-DMAP2h组)。结果显示,CHX5h组的分裂率、早期胚胎基因表达率和囊胚发育率最高,且显著高于CM3h-DMAP2h组(66.7%比49.5%,p<0.05;66.7%比40.0%,p<0.01;22.2%比9.9%,p<0.05)。ICSI18h后检查原核形成率,发现CHX5h和CHX3h-DMAP2h处理组的完整精子头百分率显著低于CM3h-DMAP2h处理组(p<0.05),2原核(pronucleus,PN)百分率则显著提高(42.4%比23.8%,p<0.05;44.6%比23.8%,p<0.01)。以上结果表明,在水牛ICSI介导转基因时,Ion联合CHX较Ion联合6-DMAP激活重构胚效果好。
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| 关 键 词： | 水牛 ICSI介导转基因 激活 |
Effects of Different Activation Treatments on ICSI-Mediated Gene Transfer in Water Buffalo |
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| Chen Zihong
,
Wei Yu
,
Meng Fanli
,
Lu Fenghua
,
Cui Kuiqing
,
Shi Deshun.Effects of Different Activation Treatments on ICSI-Mediated Gene Transfer in Water Buffalo[J].Genomics and Applied Biology,2012,31(4):355-359. |
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| Authors: | Chen Zihong Wei Yu Meng Fanli Lu Fenghua Cui Kuiqing Shi Deshun |
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| Institution: | 1 State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Agricultural Bioresources in the Subtropics,Guangxi University,Nanning,530004;2 Population and Family Planning Research Centre of Guangxi Zhuang Autonomous Region,Nanning,530021 |
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