| 哈茨木霉A25-2纤维二糖水解酶玉基因的克隆及其编码催化功能域的序列在绿色木酶HP35-3中的表达 |
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| 引用本文： | 卢业飞,吴柳,秦秀林,冯家勋,刘君梁.哈茨木霉A25-2纤维二糖水解酶玉基因的克隆及其编码催化功能域的序列在绿色木酶HP35-3中的表达[J].基因组学与应用生物学,2013,0(5):569-574. |
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| 作者姓名： | 卢业飞 吴柳 秦秀林 冯家勋 刘君梁 |
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| 作者单位： | 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，广西大学生命科学与技术学院，南宁，530004 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金创新研究团队项目“生物质转化微生物资源及其基因资源的开发利用研究”(项目编号：20-12GXNSFGA060005) |
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| 摘 要： | 本研究从哈茨木霉(Trichoderma harzianum) A25-2总RNA中利用RT-PCR的方法扩增到其纤维二糖水解酶I基因的cDNA序列，并对该基因编码的氨基酸序列进行分析，得到cbhI基因中编码催化功能域的序列。将催化功能域编码序列克隆到表达载体pCP-GH中，用PEG-CaCl2介导的原生质体转化方法将重组质粒转化到绿色木霉(Trichoderma viride) HP35-3中，筛选得到12个转化子。以p-NPC为底物，测定了该12个转化子的酶活力，获得比活力最高的转化子Tv/CDHl-CBM-5，其纤维二糖水解酶活力是HP35-3的3.8倍。SDS-PAGE分析表明，绿色木霉表达了导入的含A25-2纤维二糖水解酶I催化功能域的编码序列。
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| 关 键 词： | 哈茨木霉 纤维二糖水解酶I 绿色木霉 原生质体 催化功能域 转化 |
Cloning of the Gene Encoding Cellobiohydrolase I from Tric hode rma harz ianum A25-2 and Expression of the Sequence Encoding the Enzyme's Catalytic Domain in Tric hode rma v iride HP35-3 |
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| Lu Yefei
,
Wu Liu
,
Qin Xiulin
,
Feng Jiaxun
,
Liu Junliang.Cloning of the Gene Encoding Cellobiohydrolase I from Tric hode rma harz ianum A25-2 and Expression of the Sequence Encoding the Enzyme's Catalytic Domain in Tric hode rma v iride HP35-3[J].Genomics and Applied Biology,2013,0(5):569-574. |
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| Authors: | Lu Yefei Wu Liu Qin Xiulin Feng Jiaxun Liu Junliang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trichoderma harzianum cbhI Trichoderma viride Protoplast Catalytic domain Transformation |
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