| 灰毡毛忍冬LmCCoA OMT基因的全长克隆及功能初步分析 |
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| 引用本文： | 黄益智,乔中全,刘思思,陈可欣,黄小珍,何钢.灰毡毛忍冬LmCCoA OMT基因的全长克隆及功能初步分析[J].基因组学与应用生物学,2021,40(1):325-333. |
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| 作者姓名： | 黄益智 乔中全 刘思思 陈可欣 黄小珍 何钢 |
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| 作者单位： | 中南林业科技大学生命科学与技术学院,长沙,410004;湖南省林业科学院,湖南省林业特色生物资源与利用工程中心,长沙,410004;湖南省林业科学院,湖南省林业特色生物资源与利用工程中心,长沙,410004;中南林业科技大学生命科学与技术学院,长沙,410004 |
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| 摘 要： | 绿原酸是灰毡毛忍冬生长发育过程中产生的重要的次级代谢产物,而CCoA OMT是绿原酸合成过程中的关键基因.为进一步揭示灰毡毛忍冬LmCCoA OMT基因的功能,本研究利用RACE技术克隆LmC-CoA OMT全长基因,通过生物信息学进行分析,并在大肠杆菌中表达该蛋白.此外,通过RT-qPCR和HPLC的方法研究CCoA OMT基因表达量和绿原酸的含量之间的相关性.结果显示LmCCoA OMT基因全长1 096 bp(GenBank:MN103348),ORF 735 bp,编码245个氨基酸.系统进化树分析发现LmCCoA OMT与藤本植物牵牛花的亲缘关系最近.生物信息学分析表明LmCCoA OMT的氨基酸序列不具有跨膜结构,其蛋白三级结构主要以α-螺旋和无规卷曲的形式存在.在大肠杆菌BL21(DE3)中表达结果显示,其分子量为31.36 kD.RT-qPCR及HPLC结果表明,CCoA OMT基因在灰毡毛忍冬和金银花早期花中表达量最高,在末期表达量最低,且表达量与绿原酸含量有相关性.本研究为深入研究LmCCoA OMT基因功能及阐明灰毡毛忍冬绿原酸合成的分子机制提供了科学依据.
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| 关 键 词： | 灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand-Mazz) LmCCoA OMT 绿原酸 表达模式 蛋白表达 |
Cloning and Functional Analysis of LmCCoA OMT Gene from Lonicera macranthoides Hand-Mazz |
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| Huang Yizhi,Qiao Zhongquan,Liu Sisi,Chen Kexin,Huang Xiaozhen,He Gang.Cloning and Functional Analysis of LmCCoA OMT Gene from Lonicera macranthoides Hand-Mazz[J].Genomics and Applied Biology,2021,40(1):325-333. |
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| Authors: | Huang Yizhi Qiao Zhongquan Liu Sisi Chen Kexin Huang Xiaozhen He Gang |
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