| 广西甜茶ISSR-PCR反应条件的建立与优化 |
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| 引用本文： | 黄夕洋,唐辉,孔德鑫,王满莲,史艳财,邹蓉.广西甜茶ISSR-PCR反应条件的建立与优化[J].基因组学与应用生物学,2013(4). |
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| 作者姓名： | 黄夕洋 唐辉 孔德鑫 王满莲 史艳财 邹蓉 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所，桂林，541006 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金，桂林市科技攻关项目，广西植物研究所基本业务费项目 |
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| 摘 要： | 为了探讨广西甜茶ISSR实验中的多种因素对实验结果的影响，采用单因素法对PCR反应体系中的5个潜在因素(Mg2+, dNTP,引物, Taq酶和模板DNA)在5水平上进行优化实验，并进一步优化了反应程序中的退火温度和循环次数。结果表明：25滋L的最佳反应体系为，1×PCR Buffer、MgCl22.0 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、引物0.8滋mol/L、Taq DNA聚合酶0.75 U、模板DNA 80 ng；最佳反应程序为：在94℃下进行3 min预变性；随后循环扩增35次(包括94℃变性1 min,54℃退火1 min,72℃延伸1 min)；最后在72℃下延伸10 min。本研究建立的广西甜茶的最佳ISSR-PCR反应条件为进一步进行遗传多样性研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 广西甜茶 ISSR PCR反应条件 单因素优化 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction Conditions in Rubus suavis simus S. Lee |
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| Huang Xiyang
,
Tang Hui
,
Kong Dexin
,
Wang Manlian
,
Shi Yancai
,
Zou Rong.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction Conditions in Rubus suavis simus S. Lee[J].Genomics and Applied Biology,2013(4). |
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| Authors: | Huang Xiyang Tang Hui Kong Dexin Wang Manlian Shi Yancai Zou Rong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rubus suavissimus S Lee ISSR PCR reaction conditions Single factor experiment |
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