| 毛薯ISSR-PCR反应体系的建立 |
| |
| 引用本文： | 罗欣,周鑫,程文杰,黄小龙,黄东益.毛薯ISSR-PCR反应体系的建立[J].基因组学与应用生物学,2010,29(1). |
| |
| 作者姓名： | 罗欣 周鑫 程文杰 黄小龙 黄东益 |
| |
| 作者单位： | 海南大学农学院,海南儋州,571737 |
| |
| 基金项目： | 海南省重点学科建设专项，高等学校博士学科点专项科研基金 |
| |
| 摘 要： | 本研究主要建立毛薯ISSR-PCR的最佳反应体系。研究采用改良CTAB法提取毛薯总基因组DNA,应用单因子实验法设定模板DNA,Mg2+浓度,dNTP浓度,Tap酶浓度以及退火温度的5个不同梯度,探讨单因素变化对毛薯ISSR-PCR扩增的影响。实验结果表明,毛薯ISSR-PCR最佳反应体系为:总体积20μL,模板DNA为50ng、Taq酶为0.8U、Mg2+浓度为2.0mmol/L、引物浓度为0.5μmol/L、dNTPs浓度为0.5mmol/L。
|
| 关 键 词： | 毛薯 反应体系 |
Establishment of ISSR-PCR System in Dioscorea esculenta (lout) Brukill |
| |
| Luo Xin,Zhou Xin,Cheng Wenjie,Huang Xiaolong,Huang Dongyi.Establishment of ISSR-PCR System in Dioscorea esculenta (lout) Brukill[J].Genomics and Applied Biology,2010,29(1). |
| |
| Authors: | Luo Xin Zhou Xin Cheng Wenjie Huang Xiaolong Huang Dongyi |
| |
| Abstract: | In this study, we have established and optimized ISSR-PCR system of D. esculenta, and we used modi-fied CTAB method to extract its genomic DNA, then setting 5 different gradient by single factor experiment with template DNA, Mg~(2+) concentration, dNTP concentration, template concentration and annealing temperature, in or-der to investigate the effect of single-factor change on ISSR-PCR amplification of D. esculenta. The experimental result showed that the optimized ISSR reaction system ofD. esculenta was as below, 50 ng template DNA, 0.8 U Taq |
| |
| Keywords: | ISSR-PCR |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
