siRNA干扰PDGFRβ抑制新生儿血管瘤干细胞的增殖和分化

为了研究血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)在血管瘤干细胞(Hem-SCs)中的表达,并探讨PDGFRβsiRNA对Hem-SCs增殖、凋亡和分化的影响。本研究通过组织消化法和免疫磁珠分选法从新生儿血管瘤组织中分离Hem-SCs,并通过流式细胞术鉴定细胞免疫表型;并使用Western blotting法检测PDGFRβ蛋白在Hem-SCs中的表达水平。通过lipofectamine 2000将PDGFRβsiRNA转染到Hem-SCs细胞,使用CCK8和流式细胞术分别检测PDGFRβsiRNA对Hem-SCs增殖和凋亡的影响;经过Western blotting检测PDGFRβsiRNA对Hem-SCs Sox2、Oct4和Notch1蛋白表达的影响。流式细胞术检测结果显示,CD133和CD90在分离的Hem-SCs中阳性率分别为99.8%和96.7%;Western blotting结果显示PDGFRβ蛋白在Hem-SCs细胞中的表达显着高于血管瘤内皮细胞;CCK8结果显示,与Control组比较,PDGFRβsiRNA组细胞增殖率显著降低(p<0.01);流式检测结果显示,与Control组比较,PDGFRβsiRNA组Hem-SCs凋亡率为显著升高(p<0.01);Western blotting结果显示,与Control组比较,PDGFRβsiRNA组Sox2、Oct4和Notch1蛋白表达显著降低(p<0.01)。本研究结果表明,siRNA干扰PDGFRβ能够抑制Hem-SCs增殖和分化,促进Hem-SCs凋亡。