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普通烟草八氢番茄红素脱氢酶基因的原核表达及表达谱分析
引用本文:钟晓武,付强,邹颉,林世峰,郭玉双,赵杰宏,任学良.普通烟草八氢番茄红素脱氢酶基因的原核表达及表达谱分析[J].植物遗传资源学报,2014,15(4):838-843.
作者姓名:钟晓武  付强  邹颉  林世峰  郭玉双  赵杰宏  任学良
作者单位:贵州省烟草科学研究院,贵州省烟草科学研究院,贵州省烟草科学研究院,贵州省烟草科学研究院,贵州省烟草科学研究院,贵州省烟草科学研究院,贵州省烟草科学研究院
基金项目:中国烟草总公司基因组重大专项(110201201006)、贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字【2011】3047号)、中国烟草总公司重点项目(中烟办【2010】221号)和贵州省优秀青年科技人才培养对象专项资金(黔科合人字【2013】02 号)。
摘    要:基于NCBI数据库中本氏烟(Nicotiana benthamiana)的烟草八氢番茄红素脱氢酶PDS基因(ABE99707)的核苷酸序列,设计并合成特异性引物,以烟草栽培品种红花大金元叶片总RNA为模板,通过PCR方法获得了烟草NtPDS基因的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1749 bp,编码582个氨基酸,推测该蛋白等电点为7.53,理论分子量为65.04 kD。通过构建融合表达载体pET-32a-NtPDS,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃下经1 mmol/L IPTG诱导4 h表达后,产生了以可溶性蛋白形式存在的NtPDS融合蛋白,并通过Western blotting验证融合蛋白获得表达。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,该基因在烟草的叶片、花和茎中均有表达,在根中没有表达。该结果为进一步研究烟草八氢番茄红素脱氢酶NtPDS的活性和生物学功能奠定了基础。

关 键 词:烟草  八氢番茄红素脱氢酶  原核表达  表达谱
收稿时间:2013/9/12 0:00:00
修稿时间:2013/11/19 0:00:00

Prokaryotic Expression and Expression Pattern Analysis of Phytoene Desaturase Gene in Tobacco (Nicotiana tabacum)
ZHONG Xiao-wu;FU Qiang;ZOU Jie;LIN Shi-feng;GUO Yu-shuang;ZHAO Jie-hong;REN Xue-liang.Prokaryotic Expression and Expression Pattern Analysis of Phytoene Desaturase Gene in Tobacco (Nicotiana tabacum)[J].Journal of Plant Genetic Resources,2014,15(4):838-843.
Authors:ZHONG Xiao-wu;FU Qiang;ZOU Jie;LIN Shi-feng;GUO Yu-shuang;ZHAO Jie-hong;REN Xue-liang
Institution:ZHONG Xiao-wu;FU Qiang;ZOU Jie;LIN Shi-feng;GUO Yu-shuang;ZHAO Jie-hong;REN Xue-liang;Guizhou Academy of Tobacco Science /Key Laboratory of Molecular Genetics of China National Tobacco Corporation;Medicine Research Center,Afflicated Hospital of North Sichuan Medical College;Department of Biology,College of Basic Meolicine,North Sichuan Medical Collegc;
Abstract:
Keywords:Nicotiana tabacum  Phytoene Desaturase  Prokaryotic Expression  Expression profile
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