| 干种子高质量总RNA的快速提取方法 |
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| 引用本文： | 胡群文,陈晓玲,张志娥,辛 霞,卢新雄,刘旭.干种子高质量总RNA的快速提取方法[J].植物遗传资源学报,2010,11(3):360-363. |
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| 作者姓名： | 胡群文 陈晓玲 张志娥 辛 霞 卢新雄 刘旭 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院作物科学研究所/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室,北京,100081;安徽省安庆市种植业管理局,安庆,246001
2. 中国农业科学院作物科学研究所/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室,北京,100081 |
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| 基金项目： | 农作物基因资源安全保存评价关键技术研究，农业部农作物种质资源保护利用项目 |
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| 摘 要： | 高效快速提取高质量的种子RNA是种子分子生物学研究的基础。现有的提取方法难以高效快速地从种子中得到高质量的总RNA。本试验有机地将改进SDS法和异硫氰酸胍法相结合,采用改进的酸性SDS提取液、不溶性PVPP(聚乙烯聚吡咯烷酮)阻止酚类氧化、KAc去除多糖、异丙醇沉淀RNA,可以高效地从0.01～0.1g水稻、大豆、蚕豆、芸豆、花生等干种子中提取到高质量总RNA。此法提取的总RNA,能够满足分子生物学研究的要求,可以进行反转录和RT-PCR反应,用于基因表达研究,并为从具相似成分的其他物种干种子提取总RNA提供参考方法。
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| 关 键 词： | 种子 总RNA提取 SDS 异硫氰酸胍 RNA反转录 RT-PCR |
A Rapid Extraction Method of High Quality Total RNA from Dry Seeds |
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| HU Qun-wen,CHEN Xiao-ling,ZHANG Zhi-e,XIN Xia,LU Xin-xiong,LIU Xu.A Rapid Extraction Method of High Quality Total RNA from Dry Seeds[J].Journal of Plant Genetic Resources,2010,11(3):360-363. |
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| Authors: | HU Qun-wen CHEN Xiao-ling ZHANG Zhi-e XIN Xia LU Xin-xiong LIU Xu |
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| Institution: | HU Qun-wen1,2,CHEN Xiao-ling1,ZHANG Zhi-e1,XIN Xia1,LU Xin-xiong1,LIU Xu1(1Key Laboratory of Crop Germplasm Resources & Biotechnology,Ministry of Agriculture / Institute of Crop Sciences,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,2Bureau of planting management of Anqing City,Anqing 246001) |
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| Abstract: | Extraction of high-quality RNA is the base for seeds molecular biology research.Rapid isolation of high-quality total RNA from dry seeds is difficult by the extraction methods reported previously.In this new protocol,SDS and guanidinium thiocyanate methods were combined for RNA extraction and high-quality of total RNA was obtained in about 3.5h.Extraction at low pH,precipitation of polysaccharides with potassium acetate,usage of phenol blocker polyvinylpolypyrrolidone(PVPP)yielded high-quality RNA from rice... |
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| Keywords: | |
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