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油茶长链脂肪酰基CoA合成酶基因1(CoLACS1)分子特征与表达分析
引用本文:江南,谭晓风,张琳,李泽,蒋瑶,黄丽媛.油茶长链脂肪酰基CoA合成酶基因1(CoLACS1)分子特征与表达分析[J].植物遗传资源学报,2017,18(1):139-147.
作者姓名:江南  谭晓风  张琳  李泽  蒋瑶  黄丽媛
作者单位:湖南工业大学,湖南工业大学,中南林业科技大学,中南林业科技大学,中南林业科技大学,中南林业科技大学,中南林业科技大学
基金项目:国家林业公益性行业科研专项重大项目(201404702);湖南省自然科学基金项目(2016JJ5031)
摘    要:长链脂肪酰基Co A合成酶(LACS)在脂肪酸的合成与分解代谢中起着重要作用。本研究以油茶(Camellia oleifera Abel)国家审定品种华硕(Camellia oleifera Huashuo)种仁转录组数据为基础,根据LACS基因Unigene序列设计引物,分离克隆了油茶LACS1基因全长c DNA序列,命名为CoLACS1(Gene Bank登录号:KJ960228),全长2114 bp,开放阅读框2088 bp,编码695个氨基酸;生物信息学分析显示CoLACS1具有3个B1ock,从分子特征可判断CoLACS1属于LACS家族;氨基酸同源比对显示与其他物种的LACS氨基酸序列具有较高的相似性,其中与拟南芥LACS7相似性为78%,与麻风树、大豆、毛果杨等物种LACS6(peroxisomal)相似性可达80%以上;对CoLACS1进行原核表达分析,构建的p ET30a-CoLACS1载体成功转化至BL21(DE3)中经1 mmol/L IPTG诱导表达,菌液检测获得预测的目的蛋白(分子量约为76 k D);分析转录组数据中CoLACS1的Unigene序列RTKM值并对CoLACS1进行实时荧光定量PCR分析,结果表明CoLACS1在油茶华硕种子发育各时期平稳表达,表达丰度变化不大,荧光定量结果变化规律与转录组数据分析一致;同时分析华硕种仁不同时期含油率和脂肪酸成分变化,双变量统计分析发现CoLACS1表达模式与油茶油脂积累规律呈显著相关性。本研究为进一步研究油茶油脂积累与代谢的基因调控提供理论依据。

关 键 词:油茶  长链脂肪酰基CoA合成酶  基因表达  油脂积累
收稿时间:2016/3/17 0:00:00
修稿时间:2016/5/26 0:00:00

Molecular Characterization and Expression Analysis of long chain fatty acid acyl-CoA synthetase gene 1 (CoLACS1) from Camellia oleifera
Institution:Hunan University of Technology,Hunan University of Technology,,,,,
Abstract:
Keywords:Camellia oleifera  long chain fatty acid acyl-CoA synthetase  gene expression  lipid accumulating
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