| 紫花苜蓿F-box蛋白基因MsFTL的克隆及功能分析 |
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| 引用本文： | 陈秀秀,张彤,余倩文,周薇,安逸民,杜秉昊,郭长虹.紫花苜蓿F-box蛋白基因MsFTL的克隆及功能分析[J].植物遗传资源学报,2019(3):750-759. |
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| 作者姓名： | 陈秀秀 张彤 余倩文 周薇 安逸民 杜秉昊 郭长虹 |
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| 作者单位： | 黑龙江省分子细胞遗传与遗传育种重点实验室/哈尔滨师范大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31770575;31470571);国家高技术研究发展计划项目(2013AA102607);黑龙江省重大攻关目(GA18B104);国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08004-002)~~ |
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| 摘 要： | FTL(F-box Triple LRR protein)是F-box蛋白家族的成员,具有F-box保守结构域,在植物抵御逆境胁迫过程中起重要作用。本研究参考低温胁迫下紫花苜蓿转录组数据设计引物,通过RT-PCR克隆获得紫花苜蓿MsFTL基因,该基因的全长1422 bp,编码473个氨基酸。该蛋白含有1个F-box结构域及3个LRR重复。系统进化分析表明,MsFTL与蒺藜苜蓿XP_003626345.1 F-box/FBD/LRR-repeat protein亲缘关系最近。两者蛋白序列比对发现共有11个差异位点。在低温、盐、干旱以及外源ABA处理下,MsFTL基因受到诱导,表达量上调。构建植物过表达载体pCBM-MsFTL,通过农杆菌介导法转化烟草。对经过抗性筛选、PCR和Real-time PCR验证的转基因植株进行低温抗性鉴定。在-4℃低温胁迫下,野生型烟草叶片出现了明显的萎蔫失水现象,而转基因烟草萎蔫程度相对较轻。生理检测结果表明,4℃处理24 h之后,转基因烟草的可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、SOD活性,CAT活性高于野生型,MDA含量低于野生型。本研究表明,MsFTL基因在提高植物对低温胁迫的抗性方面具有重要的作用。
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| 关 键 词： | 紫花苜蓿 MsFTL基因 低温 基因克隆 功能分析 |
Cloning and Functional Analysis of F-box Protein Gene MsFTL in Alfalfa(Medicago sativa L.) |
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| CHEN Xiu-xiu,ZHANG Tong,YU Qian-wen,ZHOU Wei,AN Yi-min,DU Bing-hao,GUO Chang-hong.Cloning and Functional Analysis of F-box Protein Gene MsFTL in Alfalfa(Medicago sativa L.)[J].Journal of Plant Genetic Resources,2019(3):750-759. |
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| Authors: | CHEN Xiu-xiu ZHANG Tong YU Qian-wen ZHOU Wei AN Yi-min DU Bing-hao GUO Chang-hong |
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| Institution: | (Key Laboratory of Molecular Cytogenetics and Genetic Breeding of Heilongjiang Province/College of Life Science and Technology, Harbin Normal University, Harbin 150000) |
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| Abstract: | CHEN Xiu-xiu;ZHANG Tong;YU Qian-wen;ZHOU Wei;AN Yi-min;DU Bing-hao;GUO Chang-hong(Key Laboratory of Molecular Cytogenetics and Genetic Breeding of Heilongjiang Province/College of Life Science and Technology, Harbin Normal University, Harbin 150000) |
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| Keywords: | alfalfa MsFTL gene low temperature gene clone functional analysis |
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