| SV40增强子对奶牛β-酪蛋白启动子活性的影响 |
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| 引用本文： | 钟宇,邵正,江黎明.SV40增强子对奶牛β-酪蛋白启动子活性的影响[J].中国细胞生物学学报,2013(2):175-179,187. |
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| 作者姓名： | 钟宇 邵正 江黎明 |
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| 作者单位： | 广东医学院分析中心;广东医学院寄生虫学教研室;广东医学院生物化学与分子生物学研究所 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金(批准号:5011595)资助的课题~~ |
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| 摘 要： | 该文采用重叠PCR方法在奶牛β-酪蛋白启动子(op0)中插入SV40增强子构建重组启动子op0-SV40enh,并分析其活性。首先PCR扩增op0 5′-端2.1 Kb片段、op0 3′-端1 Kb片段和SV40增强子序列,重叠PCR拼接三种片段得到插入SV40增强子的op0-SV40enh启动子并测序鉴定后,酶切连接将其插入pGL3-Basic中的指定克隆位点,构建重组载体pGL3-op0-SV40enh。将重组载体pGL3-op0和pGL3-op0-SV40enh分别瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测启动子op0和op0-SV40enh的相对活性。结果显示,重叠PCR拼接出长度为3.4 Kb的片段,测序结果与预期结果一致,表明成功构建了重组载体pGL3-op0-SV40enh;op0-SV40enh启动子的活性远高于op0启动子的活性,表明奶牛β-酪蛋白启动子中插入SV40增强子序列可显著提高其引导荧光素酶报告基因表达的活性。
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| 关 键 词： | SV40增强子 奶牛op0 双荧光素酶报告基因检测系统 |
Effect of SV40 Enhancer on Cow β-casein Promoter Activity |
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| Authors: | Zhong Yu Shao Zheng Jiang Liming |
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| Institution: | 1Analysis Center of Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023,China;2Department of Parasitology,Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023,China;3Institute of Biochemistry and Molecular Biology,Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023,China) |
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