利用HRM技术区分ob糖尿病小鼠不同基因型 |
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引用本文: | 刘苏,周舒雅,左琴,王辰飞,贺争鸣,李保文,刘佐民,范昌发.利用HRM技术区分ob糖尿病小鼠不同基因型[J].中国细胞生物学学报,2014(10). |
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作者姓名: | 刘苏 周舒雅 左琴 王辰飞 贺争鸣 李保文 刘佐民 范昌发 |
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作者单位: | 中国食品药品检定研究院; |
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基金项目: | 国家科技支撑计划(批准号:2013BAK11B02);中国食品药品检定研究院中青年中青年发展研究基金(批准号:2012B5)资助的课题~~ |
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摘 要: | ob/ob小鼠是糖尿病相关研究中使用最广泛的动物模型之一,近年来,市场需求呈上升趋势。与野生型小鼠相比,其瘦素蛋白基因105号密码子发生CT点突变,导致不能产生正常的瘦素蛋白。该模型4周前外观表型与野生型无异,而ob/ob纯合子不育,因而在繁殖建系过程中,需要通过基因型鉴定纯合、杂合和野生三种基因型。该文建立了基于高分辨率溶解曲线分析(high resolution melting analysis,HRM)的基因型鉴定方法,基因型分型结果与常规PCR加酶切方法一致,也与DNA测序结果吻合;通过该方法分型后获得纯合子小鼠外观表型、血糖浓度参数符合预期。该方法较常规方法省时、高效、节省实验成本,可用于大规模ob小鼠繁殖中的基因型鉴定。
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关 键 词: | ob小鼠 基因型鉴定 HRM |
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