雷帕霉素对低氧下HL-60细胞的低氧调控信号分子表达的影响

摘要目的：通过小分子化合物氯（CoCt2）模拟的低氧环境，分析低氧下及其雷帕霉素（RPM）作用下人急性髓细胞白血病细胞HL．60的低氧调控信号分子表达的变化；方法：常规方法复苏、传代、培养HL-60细胞，培养细胞进入对数生长期后用于实验。低氧模拟组、低氧雷帕霉素处理组、常氧雷帕霉素处理组分别用含2001xmol／LCoCl2、2001xmol／LCOCl2／20nmol／LRPM、20nmol／LRPM的1640培养基处理生长状态良好的细胞，对照组细胞用1640培养基培养，各组置培养箱以37℃、5％CO2培养，并于处理后24h、48h、72h收集细胞用于检测；采用实时荧光定量PCR方法检测低氧诱导因子（HIF-1α）、内皮细胞生长因于（VEGF）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及GAPDH在转录水平的表达；结果：①与各时段对照组相比，低氧模拟组HIF-1α表达随时间逐渐增加，72h明显上调；与常氧雷帕霉素处理组各时段比较，低氧雷帕霉素处理组HIF-1α表达早期（24h）相对下调，后期相对上调；②．与对照组比较，各处理组mTOR表达均下调，低氧雷帕霉素处理组在早期（24h）下调显著；与常氧雷帕霉素处理组比较，低氧雷帕霉素处理组mTOR各时段的表达均相对下调；③与对照组各时段相比，低氧模拟组VEGF的表达在早期显著上调，但后期呈下调；常氧雷帕霉素处理组各时段VEGF的表达下调，与其比较，低氧雷帕霉素处理组各时段均呈相对下调。结论：常氧和低氧下RPM作用HL-60细胞后VEGF、mTOR的mRNA均表达下调，RPM可在低氧环境下增强了这种下调表达作用。

The Effects of Rapamycin on Expression of Hypoxia Signal Molecules in Human Acute Myeloid Leukemic Cell Line HL-60 Under Hypoxia