| 人结合珠蛋白cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和鉴定 |
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| 引用本文： | 孟琴,汤伟松,刘亮,李淑珍,唐晓波.人结合珠蛋白cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和鉴定[J].生物磁学,2014(24):4644-4647. |
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| 作者姓名： | 孟琴 汤伟松 刘亮 李淑珍 唐晓波 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学药学院,黑龙江哈尔滨150081 |
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| 基金项目： | 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目（2008RFXXS018） |
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| 摘 要： | 目的：克隆人结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）cDNA，并在大肠杆菌中表达和鉴定。方法：从Hela细胞中分离总RNA，采用RT-PCR方法获得人Hp cDNA，分别克隆至原核表达载体pET-32a和PGEX-4T-1，转化至大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达，并进行SDS—PAGE及Western blot鉴定。结果：成功构建了高效原核表达质粒PET-32a-Hp和PGEX-4T1-Hp；Western印迹结果表明，经IPTG诱导，在大肠杆菌中表达了分子量约30kD和37kD的目的蛋白；表达产物经Ni2^＋-NTA离子交换树脂纯化，纯度〉90％。结论：在E．coli成功表达和纯化了人Hp融合蛋白，为进一步开发人Hp诊断试剂打下基础。
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| 关 键 词： | 卵巢癌 人结合珠蛋白 克隆 表达 纯化 |
Cloning,Expression and Identification of Human Hp cDNA in Escherichia Coli |
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| MENG Qin,TANG Wei-song,LIU Liang,LI Shu-zhen,TANG Xiao-bo.Cloning,Expression and Identification of Human Hp cDNA in Escherichia Coli[J].Biomagnetism,2014(24):4644-4647. |
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| Authors: | MENG Qin TANG Wei-song LIU Liang LI Shu-zhen TANG Xiao-bo |
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| Institution: | ( Pharmacy college of Harbin Medical University, Harbin, Heilongjiang, 150081, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Oophoroma Human haptoglobin Cloning Expression Identification |
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