特异性eIF-4EsiRNA重组腺病毒构建及其对人卵巢癌细胞SKOV-3转移相关能力的影响

目的：构建表达真核细胞起始因子-4E（eukaryoticinitiationfactor4E，eIF-4E）特异性siRNA的重组腺病毒载体，观察其对人卵巢癌细胞SKOV-3体外转移能力的影响。方法：应用基因重组技术将eIF．4EsiRNA序列构建于腺病毒载体pLP－Ade－X，经包装细胞包装后得到高滴度重组腺病毒pLP—Ade-4EsiRNA（psiE）。将腺病毒psiE感染SKOV．3细胞，用定量PCR进行elf．4E基因表达检测，然后应用transwell小室法观察对细胞侵袭和运动能力的影响，同时检测感染后细胞内VEGF、MMP－2、MMP－9蛋白表达。结果：病毒检测结果与预期相符，real—timePCR可检测到感染重组腺病毒psiE后SKOV．3细胞没有eIF-4E基因表达；病毒感染后transwell小室法检测到SKOV-3细胞的侵袭和运动能力均受到显著的抑制（均为P〈0．01）；此外病毒感染的SKOV．3细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低。结论：封闭eIF-4E基因表达对人卵巢癌细胞SKOV．3的侵袭和运动都有抑制作用，其作用机制可能与VEGF、MMP-2、MMP-9表达相关。