Survivin和RhoA双基因沉默对卵巢癌细胞的增殖与侵袭影响

目的：探讨RNA干扰（RNAi）双向沉默Survivin和RhoA基因表达对人卵巢癌H08910PM细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法：构建Survivin和RhoA基因的串联microRNA干扰载体（Survivin-RhoA-microRNA），通过脂质体介导转染人卵巢癌H08910PM细胞作为实验组，对照组为空载体转染组。转染48小时后，RT—PCR检测Survivin和RhoA的mRNA表达，Western．Blot检测Survivin和RhoA的蛋白质表达；利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞术检测转染后卵巢癌细胞的增殖、侵袭及凋亡情况。结果：Survivin—RhoA—microRNA明显抑制了H08910PM细胞中Survivin和RhoA基因mRNA和蛋白的表达：转染48小时后，实验组SurvivinmRNA和RhoAmRNA表达抑制率分别为68．82％、90．23％，Survivin和RhoA蛋白表达抑制率分别为63．91％、88．47％；MTT分析显示实验组细胞OD490的值为0．706±0．177，较对照组（1．172±0．241）明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；流式细胞术检测实验组细胞凋亡率为36．41±3．34％，较对照组（2．92±0．78％）明显升高（P〈0．01）；实验组细胞侵袭百分比为12．56±6．17％，较对照组（32．96±5．14％）明显降低（P〈0．05）。结论：成功构建Survivin和RhoA串联microRNA干扰载体（Survivin．RhoA．microRNA）。Survivin和RhoA双基因沉默显著抑制了卵巢癌H08910PM细胞的增殖和侵袭能力，并增加其凋亡率，两者具有协同作用，为双靶点治疗卵巢癌提供了新的思路和策略。