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以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞
引用本文:杨俊林,刘雄昊,喻姣玲,冯劢,谭杨,李卓,吴奔,高庭,潘盛,邬玲仟,梁德生,夏家辉.以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞[J].生物磁学,2009(16):3001-3005.
作者姓名:杨俊林  刘雄昊  喻姣玲  冯劢  谭杨  李卓  吴奔  高庭  潘盛  邬玲仟  梁德生  夏家辉
作者单位:中南大学医学遗传学国家重点实验室,湖南长沙410078
基金项目:基金项目:国家重点基础研究发展计划(2004cB518800),国家高技术研究发展计划(2007AA021002和2007AA021206)和国家自然科学基金(30700458和30971298)
摘    要:目的:比较人皮肤成纤维细胞(humandermalfibroblasts,HDFs)与小鼠胚胎成纤维细胞(Mouseembryonicfibroblasts,MEFs)的增殖能力及研究人皮肤成纤维细胞作为饲养层支持人胚胎干细胞(humanembryonicstemcells,hESCs)未分化生长的能力。方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出HDFs,通过细胞形态的观察和生长曲线的绘制比较HDFs与MEFs的体外增殖能力。将HDFs作为饲养层细胞与hESCs共培养,传代12代后,检测hESCs碱性磷酸酶(AKP)、表面特异性标志及胚胎干细胞特异性转录因子。结果:HDFs可连续传代培养15代以上,10代以下的HDFs增殖迅速,而MEFs自第4代起,增殖能力就明显下降;hESCs在HDFs饲养层上可传代培养12代以上,克隆边界清晰,细胞排列紧密,碱性磷酸酶、表面标志物检测均呈阳性,表达了hESCs特异性转录因子。结论:HDFs比MEFs具有更强的增殖能力;HDFs可作为培养hEscs的饲养层细胞。

关 键 词:人胚胎干细胞  人皮肤成纤维细胞  饲养层细胞

Culture of human embryonic cells by using human dermal fibroblasts as feeder cells
Institution:YANG Jun-lin, LIU Xiong-hao, YU Jiao-ling, FENG Mai, TAN Yang, LI Zhuo, WU Ben, GAO Ting, PAN Sheng, WU Ling-qian, LIANG De-sheng, XIA dia-hui (State Key Laboratory of Medical Genetics, Central South University, Changsha, 410078, China)
Abstract:
Keywords:Human embryonic stem cells  Human dermal fibroblasts  Feeder cells
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