SynaptotagminI和IV在LβT2细胞中的定位和shRNA基因干扰研究

目的：研究Sytnaptotagmin（Syt）I和Ⅳ在LβT2细胞中的定位和shRNA干扰技术对这两种蛋白在促性腺激素释放细胞（LβT2）细胞中蛋白表达量的影响。方法：运用全内反射荧光显微系统，通过在LβT2细胞中共表达各种细胞器的蛋白标记物和Syt I、Ⅳ与荧光蛋白的融合蛋白，对SytI、Ⅳ进行细胞内定位。并运用shRNA干扰技术对sytI、Ⅳ在L8T2细胞中蛋白表达量进行了干扰。结果：发现了sytI、sytⅣ在LβT2细胞中和致密核心大囊泡（LDCV）都存在了一定的共存比例，而且shRNA技术对SytI和SytⅣ在LβT2细胞中的表达沉默产生了一定的效用。结论：SytI、SytⅣ在LβT2细胞中与致密核心大囊泡共存比例很大，shRNA干扰技术对SytI、SytⅣ的沉默具有高效性，为未来进一步对SytI、SytⅣ在LβT2细胞中的功能研究打下了基础。

The Localization of Synaptotagmin I, IV and the Effect of shRNA in LβT2 Cells

Objective： To observe localizations of Syt I, and Syt IV in LβT2 cells and test the expression of Syt I, IV in LβT2 cells after silenced by shRNA. Methods： We used the total internal reflection fluorescence microscopy（TIRFM） to observe localizations of Syt I, and Syt IV in LβT2 cells, and silenced the expression Syt I,IV by shRNA technology. Results： The fusion proteins of Syt I, IV with fluorescent proteins are mostly co-localized with the maker of the large dense vesicle. And shRNA technology has a good efficiency on silencing Syt I, Syt IV in LβT2 cells. Conclusions： Syt I, Syt IV are colocalized with LDCV in LβT2 cells. The technology of shRNA for Syt I and Syt IV has a good efficiency and it is useful for the Syts function research in LβT2 cells.