| 人脆性组氨酸三联体（FHIT）基因的克隆及在HeLa细胞中表达的研究 |
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| 引用本文： | 刘慧,梁浩,刘明秋,扈延茂.人脆性组氨酸三联体（FHIT）基因的克隆及在HeLa细胞中表达的研究[J].生物磁学,2009(15):2808-2813,2860. |
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| 作者姓名： | 刘慧 梁浩 刘明秋 扈延茂 |
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| 作者单位： | [1]内蒙古大学生命科学学院 [2]内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,新疆呼和浩特010021 |
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| 基金项目： | 基金项目：内蒙古自然科学基金项目（重点：200607010502;200711020517） |
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| 摘 要： | 目的：构建人脆性组氨酸三联体（fragile histidine triad gene,fhit）基因与报告基因egfp的双顺反子表达载体及融合表达载体,研究fhit基因过表达对HeLa细胞生长及凋亡的影响。方法：根据已知fhit基因的mRNA序列,RT-PCR得到493bp的cDNA序列,将其构建到pMD18-T中,筛选目的片段插入正确的重组质粒,经限制性内切酶切割,回收目的片段分别插入双顺反子表达载体pIRES2-EGFP和融合表达载体pEGFP-C1的多克隆位点中。再以脂质体介导转染HeLa细胞,G418筛选稳定转染的克隆,分别通过基因组PCR、RT-PCR、免疫细胞化学及TUNEL法在DNA、RNA和蛋白质水平检测其表达情况。结果：转基因细胞基因组PCR获得493bp片段,证明目的基因已整合到细胞基因组中;RT-PCR检测其在RNA水平得到表达;免疫细胞化学及TUNEL法分析表明fhit基因在HeLa细胞内实现了稳定遗传与表达。结论：实验证明fhit基因过表达可有效促进HeLa细胞的凋亡。
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| 关 键 词： | FHIT 过表达 HeLa细胞 凋亡 |
Cloning of Fragle Histidine Triad Gene and Identifying Its Expression in Hela Cell |
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| Institution: | LIU Hui, LIANG Hao, LIU Ming-qiu, Hu Tingmao (1 School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Huthhot, 010021, China; 2 Ministry of Education Key Laboratory for Mammal Reproduction Biology and Biotechnology, loner Mongolia University, Huhhot, 010021, China ) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FHIT Over Expression HeLa Cell Apoptosis |
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