| 治疗糖尿病的短肽药物GLP-1在毕赤酵母中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 侯建华,王翠艳,方园园,杨少辉,薄涛,杨立泉,于雷,李明刚.治疗糖尿病的短肽药物GLP-1在毕赤酵母中的分泌表达[J].生物学通报,2006,41(4):44-47. |
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| 作者姓名： | 侯建华 王翠艳 方园园 杨少辉 薄涛 杨立泉 于雷 李明刚 |
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| 作者单位： | 南开大学分子生物学研究所生物活性材料教育部重点实验室,天津,300071 |
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| 基金项目： | 国家863项目(NO．2002AA213061)资助 |
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| 摘 要： | 利用毕赤酵母表达治疗糖尿病的短肽药物GLP-1(胰高血糖素样肽-1)。以pUC18GLP-1 为模板进行PCR,将获得的GLP-1基因片段克隆到pMD18T-vector上,然后将SmaI和NotI双酶切获得的基因小片段插入到表达载体pPIC9上,完成表达载体pPIC9GLP-1的构建,SacI线性化重组质粒,通过醋酸锂转化法转化毕赤酵母GS115感受态细胞,成功构建了能够分泌抗二肽酶Ⅳ降解的长效促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌株。结果表明毕赤酵母6号菌株的GLP-1分泌表达产量最高可达 100．00 mg／L．实现了GLP-1在毕赤酵母中的表达,为进一步开发治疗糖尿病新型短肽药物的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 糖尿病 胰高血糖素样肽-1 毕赤酵母 短肽 分泌表达 |
Secretory expression of the short peptide drug--glucagons like peptide-1 against diabetes in yeast Pichia pastoris |
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