分子生物学技术讲座(四)——真核基因组DNA的制备,分析及基因组DNA文库的构建 |
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引用本文: | 姚知行.分子生物学技术讲座(四)——真核基因组DNA的制备,分析及基因组DNA文库的构建[J].生物学通报,1997,32(9):24-24. |
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作者姓名: | 姚知行 |
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作者单位: | 北京师范大学生物学系!100875 |
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摘 要: | 真核细胞DNA的制备通常是在有EDTA及SDS一类去污剂的存在下用蛋白酶K消化细胞后用酚抽提而实现的。用此方法得到的DNA,其大小为IOO~15Okb,恰好用于SOIJthern分析和经限制性内切酶部分消化后用人噬体载体构建基因组DNA文库。而用粘粒载体或用酵母人工染色体(YAC)载体构建基因组DNA文库则需要更大的DNA。1关于DNA的制备制备真核细胞基因组DNA的方法有许多种,但基本步骤相类似,即包括组织匀浆、细胞裂解、蛋白和RNA的去除以及用乙醇沉淀或透析等方法除去残存的其它物质。方法的选择主要根据样品的类型以及所制备的DN…
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关 键 词: | 分子生物学技术 真核细胞 基因组 DNA文库 构建 |
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