TBP-like Protein（TLP）通过G2／M期阻滞抑制HeLa细胞的增殖

TBP—likeprotein（TLP）是真核细胞中一种常见的转录因子，在调节生长发育方面起着重要的作用。该实验构建重组质粒pEGFP—N1．TLP,研究TLP对人宫颈癌细胞HeLa增殖的影响。利用流式细胞仪检测质粒的转染效率，通过激光共聚焦显微镜观察外源TLP蛋白的亚细胞定位。经过MTT检测、RNAi—TLP诱导的基因沉默7LHoechst33258染色研究TLP对HeLa细胞的增殖抑制作用。流式细胞术、Westernblot和RT-PCR实验结果表明，TLP将HeLa细胞周期阻滞于G2／M期，并抑制周期相关基因CDKl和CyclinBl的转录和翻译。研究表明，外源TLP在HeLa细胞的细胞核中表达，通过降低细胞周期相关基因CDKl和CDKl的表达水平，将HeLa细胞的细胞周期阻滞于G2／M期，从而抑制细胞的增殖。