不同卵龄小鼠卵母细胞激活和受精的比较研究

本实验比较了不同卵龄的小鼠卵母细胞受酒精人工刺激后的激活率和体外受精率，以探索卵母细胞激活和受精的机制。向NIH雌鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素（PMSG）7．5单位，48小时后注射人绒毛膜促性激素（HCG）7．5单位，于不同时间杀小鼠，取卵母细胞与卵丘细胞的复合体（OCC）。从注射HCG后到取OCC的时间视为卵母细胞的卵龄。将OCC置于含8％酒精的M2中7分钟，再在16中培养5小时后，用0．3mg/mL的透明质酸酶去卵丘细胞。卵母细胞形成原核或速即卵裂为激活的标志，将OCC加入已获能的精子悬液中，5小时后将从卵丘细胞中释放出来的卵母细胞转移到M16中，将日发生卵裂为卵母细胞体外受精和激活的标志。小鼠卵母细胞卵龄为20h，其激活率为81．6％，速即卵裂率为48．0％；而卵龄进一步增加到24h，激活率和卵裂率转为下降（Table1）。而卵母细胞受精子激活和受精则不同，卵龄为15h ,卵母细胞的体外受精率为45．4％；随着卵龄的进一步增加，体外受精率则下降（Table2)。Fig.1显示：新排出的卵母细胞容易被精子激活而受精；卵龄较大的卵母细胞较易被酒精的人工刺激而激活。可能是卵母细胞从成熟到老化过程中，细胞的结构、功能及对外界刺激的敏感状态都在发生一些规律性的变化，而激活和受精的机制不完全,还不能精对卵龄的要求要严格。