用改进的模式系统克隆红细胞发育相关基因 |
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引用本文: | 阚晟,李文雍,等.用改进的模式系统克隆红细胞发育相关基因[J].发育与生殖生物学报,2002,11(2):101-111. |
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作者姓名: | 阚晟 李文雍 |
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作者单位: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京100080 |
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摘 要: | 红细胞发生的研究主要依据于MEL细胞系和分离到的少量的小鼠成红细胞,MEL细胞由Friend病毒转化而来,对促红细胞生成素不敏感,而成红细胞主要来源于鸡、人、小鼠、大鼠胎肝、小鼠肾脏或骨髓,因量少,所产严重困扰着红细胞发生在分子水平上的研究。本文采用现宰杀的胎羊血液,不仅满足了分子生物学起始材料量的要求,又能直接反映出红细胞发生在体内的真实状况。通过对mRNA差异显著技术的改进,在DNA测序胶上比较胎羊成红细胞和怀孕母羊淋巴细胞扩增的cDNA片段,发现两条差异条带;其中一个片段是新基因,进行蛋白质序列预测发现与UV敏感的锥状视蛋白、视紫红质有一定的同源性,由于其血细胞对福射很敏感,故推测该片段与福射造成的细胞杀伤作用有关;另一个片段为葡萄糖诱导基因/延伸因子2的3′非编码区,该片段最早在葡萄糖诱导后的牛主动脉平滑肌细胞被克隆到。通过反向Northern杂交证明,所发现的新基因具有真实性。
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关 键 词: | 改进 模式系统 克隆 红细胞发育相关基因 胎羊 红细胞发生 成红细胞 |
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