| 应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率 |
| |
| 引用本文： | 吴金青,梅瑰,刘志国,陈瑶生,丛佩清,何祖勇.应用SSA报告载体提高ZFN和CRISPR/Cas9对猪IGF2基因的打靶效率[J].遗传,2015(1):55-62. |
| |
| 作者姓名： | 吴金青 梅瑰 刘志国 陈瑶生 丛佩清 何祖勇 |
| |
| 作者单位： | 1. 中山大学生命科学学院，有害生物控制与资源利用国家重点实验室，广州 510006
2. 广东省农业科学院动物科学研究所，畜禽育种国家重点实验室，广州 510640 |
| |
| 基金项目： | 国家转基因重大专项(编号:2013ZX08006005-005);国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(编号:2010CB945404)资助 |
| |
| 摘 要： | IGF2(Insulin-like growth factor 2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用。通过基因组编辑技术对我国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义。文章在蓝塘猪胎儿成纤维细胞(Porcine fetal fibroblasts,PEF)中检测了锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFN)和CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率,结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达9.2%,显著高于ZFN的切割效率(1%),但两者均未达到作为体细胞核移植(Somatic nuclear transfer,SCNT)供体细胞所需的打靶效率。应用SSA(Single-strand annealing)报告载体筛选技术来富集IGF2基因被ZFN和CRISPR/Cas9修饰过的PEF细胞,结果表明,该技术可使CRISPR/Cas9的打靶效率提高5倍左右,对ZFN的打靶效率具有更大的增强作用。
|
| 关 键 词： | IGF2基因 ZFN CRISPR/Cas9 SSA报告系统 |
Improving gene targeting efficiency on pig IGF2 mediated by ZFNs and CRISPR/Cas9 by using SSA reporter system |
| |
| Jinqing Wu
,
Gui Mei
,
Zhiguo Liu
,
Yaosheng Chen
,
Peiqing Cong
,
Zuyong He.Improving gene targeting efficiency on pig IGF2 mediated by ZFNs and CRISPR/Cas9 by using SSA reporter system[J].Hereditas,2015(1):55-62. |
| |
| Authors: | Jinqing Wu Gui Mei Zhiguo Liu Yaosheng Chen Peiqing Cong Zuyong He |
| |
| Institution: | Jinqing Wu;Gui Mei;Zhiguo Liu;Yaosheng Chen;Peiqing Cong;Zuyong He;State Key Laboratory of Biocontrol, School of Life Sciences, Sun Yat-sen University;Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences;State Key Laboratory of Livestock and Poultry Breeding; |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | IGF2 gene ZFN CRISPR/Cas9 SSA reporter system |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
