| ENU诱导带LacZ靶基因的λgt11 DNA突变分子机理的初步研究 |
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| 引用本文： | 吴涛,曹佳,钱频,杨明杰.ENU诱导带LacZ靶基因的λgt11 DNA突变分子机理的初步研究[J].遗传,1999,0(1). |
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| 作者姓名： | 吴涛 曹佳 钱频 杨明杰 |
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| 作者单位： | 第三军医大学预防医学系分子毒理教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目,军队青年基金 |
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| 摘 要： | 采用ENU(乙基亚硝基脲)作用于裸露的λgt11 DNA,经体外重包装,转染宿主菌 E. coli Y1090,在含底物X-gal,诱导剂IPTG的选择性培养基上铺皿,发现被处理的λgt11 DNA除了使噬菌体存活率下降外,还出现了靶基因"LacZ"较高频率的突变.其中以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂,当存活率分别为3.5×10-3、1.6×10-3和5.5×10-4 时,相应的突变率依次为1.1×10-3、3.2×10-3和5.2×10-3,DMSO溶剂对照突变率则<5.0×10-5 .对ENU诱导的5个阳性突变体进行了扩增,以PCR产物为模板,采用正向引导,对阳性突变体靶基因LacZ进行了部分测序,在被测序的260bp范围内,发现了9个位点的碱基突变.碱基突变的类型有颠换(67%)、转换(11%)和移码突变(22%).颠换主要以A→T、G→C为主.似乎胞嘧啶(C)更易发生突变(占43%).
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| 关 键 词： | LacZ基因 突变 体外重包装 诱变剂 DNA测序 |
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