重组斜带石斑鱼生长激素及其抗血清在放射免疫测定中的应用 |
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引用本文: | 冉雪琴,李文笙,林浩然.重组斜带石斑鱼生长激素及其抗血清在放射免疫测定中的应用[J].动物学报,2003,49(5):663-669. |
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作者姓名: | 冉雪琴 李文笙 林浩然 |
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作者单位: | 1. 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广州,510275;贵州大学动物科学学院,贵阳,550025 2. 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广州,510275 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划),国家自然科学基金,教育部科学技术研究项目,广东省自然科学基金,2001AA621110,2001AA621010,39970586,02150,20023002,,,, |
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摘 要: | 将斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)生长激素成熟多肽cDNA序列克隆到质粒pRSET,与6x组氨酸等原核编码序列融合获得重组质粒pRGH6,转入大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达,表达量占细菌总蛋白的43%。免疫印迹证明表达产物为含斜带石斑鱼生长激素的融合蛋白,Ni^2 亲合层析柱纯化融合蛋白,以此为抗原免疫家兔制备特异性的抗血清。以纯化的重组生长激素和特异性的抗血清建立斜带石斑鱼生长激素的放射免疫测定法,该方法的灵敏度、特异性和重复性均达到测定血液生长激素的水平。研究了多巴胺的受体激动剂阿扑吗啡对静态孵育斜带石斑鱼脑垂体碎片释放生长激素的影响,结果表明,阿扑吗啡能以剂量依存方式促进斜带石斑鱼垂体释放生长激素。
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关 键 词: | 斜带石斑鱼 生长激素 阿扑吗啡 脑垂体碎片 放射免疫测定法 |
Application of the recombinant growth hormone and its antibody in the development of radioimmunoassay in the orange-spotted grouper(Epinephelus coioides) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Orange spotted grouper( Epinephelus coioides ) Growth hormone Apomorphine Pituitary fragments Radioimmunoassay |
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