| 家蝇防御素在大肠杆菌中的表达、纯化与抗体制备 |
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| 引用本文： | 王来城,王金星,赵小凡,蔡莹.家蝇防御素在大肠杆菌中的表达、纯化与抗体制备[J].动物学报,2005,51(2):327-334. |
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| 作者姓名： | 王来城 王金星 赵小凡 蔡莹 |
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| 作者单位： | 山东大学生命科学学院,济南,250100 |
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| 基金项目： | 本研究得到高等学校骨干教师资助计划项目 (GG 180 25001 1995)，博士点基金 (20020422052)，山东省科技厅计划项目(012100104) 资助~~ |
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| 摘 要： | 家蝇防御素是从家蝇中克隆得到的1种抗菌肽。为了进一步研究家蝇防御素的功能和制备特异性抗体,采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法, 进行了家蝇防御素原核表达的研究。根据克隆到的家蝇防御素基因(Mdde) 的cDNA序列, 设计特异性引物, PCR 扩增成熟肽的cDNA片段, 将成熟肽序列重组到表达载体pGEX 4T 1中, 构建m Mdde/pGEX 4T 1重组表达载体, 在大肠杆菌BL21 中诱导表达, 重组表达的融合蛋白GST Mdde占菌体总蛋白的33 4%。纯化得到GST Mdde后, 再用凝血酶将其从特定位点切开, 得到表达的m Mdde。液体抑菌实验结果初步表明, 表达的融合蛋白GST Mdde对细菌生长有一定的抑制作用。利用纯化的GST Mdde融合蛋白, 制备了抗血清。
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| 关 键 词： | 家蝇 抗菌肽 重组表达 |
Recombinant expression in E. Coli,purification and polyclonal antibody preparation of a defensin from the housefly |
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| WANG Lai-Cheng,WANG Jin-Xing,ZHAO Xiao-Fan,CAI Ying.Recombinant expression in E. Coli,purification and polyclonal antibody preparation of a defensin from the housefly[J].Acta Zoologica Sinica,2005,51(2):327-334. |
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| Authors: | WANG Lai-Cheng WANG Jin-Xing ZHAO Xiao-Fan CAI Ying |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Housefly Musca domestica Antimicrobial peptide Recombinant expression |
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