| 文昌鱼性腺差减cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 刘晓慧,王秀,王义权.文昌鱼性腺差减cDNA文库的构建[J].动物学报,2008,54(3):482-488. |
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| 作者姓名： | 刘晓慧 王秀 王义权 |
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| 作者单位： | 厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005 |
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| 摘 要： | 本研究以日本文昌鱼(Branchiostoma japonicum)性腺cDNA为材料,应用抑制性差减杂交技术构建文昌鱼雌雄性腺的差减cDNA文库.正向差减杂交以卵巢为试验方、精巢为驱动方,反向差减杂交以精巢为试验方、卵巢为驱动方,将所获差减cDNA片段克隆插入质粒表达载体,转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含459、243个重组子.PCR 扩增鉴定正、反向差减cDNA文库的插入片段,其中90%左右的克隆皆能扩增出有效产物,插入片段范围为200-600 bp,符合差减文库PCR产物片段的大小.随机选取30个阳性克隆测序分析,得到26有效基因片段,进一步从中选取16个序列,用实时定量PCR对文库质量进行验证,结果表明所建文库能够达到富集雌雄性腺差异表达基因的目的.文昌鱼性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定性腺分化和发育相关基因奠定了基础动物学报 54(3):482-48 8,2008].
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| 关 键 词： | 文昌鱼 性腺 差减cDNA文库 抑制性差减杂交 文昌鱼 性腺分化 差减文库 japonicum Branchiostoma amphioxus gonad cDNA library 动物学 发育相关基因 分离 差异表达基因 富集 结果 验证 库质量 实时定量 序列 随机选取 基因片段 |
| 修稿时间： | 2007年11月5日 |
Construction of subtractive cDNA library of the gonad of amphioxus Branchiostoma japonicum |
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| LIU Xiao-Hui,WANG Xiu,WANG Yi-Quan.Construction of subtractive cDNA library of the gonad of amphioxus Branchiostoma japonicum[J].Acta Zoologica Sinica,2008,54(3):482-488. |
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| Authors: | LIU Xiao-Hui WANG Xiu WANG Yi-Quan |
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| Institution: | LIU Xiao-Hui,WANG Xiu,WANG Yi-Quan School of Life Sciences,Xiamen University,Xiamen 361005,Fujian,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Amphioxus Branchiostoma japonicum Gonad Subtractive cDNA library Suppression subtractive hybridization |
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