用DNA酶切小分子片段在非洲爪蟾卵提取物中实现非细胞体系核装配

用质粒ｐＢＲ３２２的ＤＮＡ酶切片段，长度分别为７５０、３７５和１８６ｂｐ作为外源ＤＮＡ在非洲爪蟾 卵提取物中实现了非细胞体系的核装配（核重建）。将分离纯化得到的 ＰＢＲ３２２ ＤＮＡ酶切后经低熔 点琼脂糖回收ＤＮＡ片段，长度为７５０、３７５和１８６ｂｐ，分别加入到爪蟾卵提取物再生系统中温育， 经ＤＡＰＩ染色、孚尔根染色及电子显微镜观察发现能装配大量的重建核。显微分光光度法研究表 明，ＤＮＡ片段在诱导形成重建核的过程中发生了明显的凝集－会凝集变化。α－３２Ｐ－ｄＣＴＰ掺入重建核 的液闪计数结果表明，ＤＮＡ酶切小分子片段诱导形成的重建核具有较高的ＤＮＡ复制活性，而且复 制活性在一定范围内与加入的ＤＮＡ片段长度呈正相关。实验结果表明，非细胞体系中诱导的核重 建不仅与外源ＤＮＡ的种类无关，与外源ＤＮＡ的长度也没有关系。

NUCLEAR RECONSTITUTION AROUND DIGESTED DNA FRAGMENTS IN CELL-FREE EXTRACTS OF XENOPUS LAEVIS EGGS