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猪卵母细胞c-mos基因表达以及RNA干扰
引用本文:刘丽清,田江天,格日乐其木格,孙爽,赵祥杰,宋军,张永富,李玉田,刘娣,刘忠华.猪卵母细胞c-mos基因表达以及RNA干扰[J].动物学报,2007,53(4):717-724.
作者姓名:刘丽清  田江天  格日乐其木格  孙爽  赵祥杰  宋军  张永富  李玉田  刘娣  刘忠华
作者单位:1. 东北农业大学生命科学学院,哈尔滨,150030;东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030
2. 东北农业大学生命科学学院,哈尔滨,150030
3. 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030
4. 黑龙江省农业科学院畜牧中心,哈尔滨,150030
基金项目:黑龙江省自然科学基金资助~~
摘    要:c-mos基因在动物卵母细胞减数分裂调控中起作用,但其作用机制目前仍不清楚。本实验通过RT-PCR、免疫荧光激光共聚焦检测方法检测了猪卵母细胞在体外成熟培养过程中c-mos基因在转录水平、翻译水平上的表达以及蛋白的分布,并应用注射小干扰RNA(siRNA)方法对其进行了RNA干扰(RNAi)研究。结果显示,猪卵母细胞在体外成熟培养过程中c-mos基因mRNA量逐渐增高,电激活后6h接近完全降解;MOS(c-mos基因蛋白产物)在GV卵母细胞生发泡中有一定量的表达,生发泡破裂(GVBD)前表达量增加且开始向卵母细胞胞质弥散,成熟培养44h未成熟卵母细胞中的MOS表达量要高于成熟卵母细胞,激活后6h核区MOS明显减少,但仍然有少量MOS分布于胞质中;成熟培养前干扰c-mos基因,所用三个siRNA都能成功敲低mRNA量,分别是同时期对照组mRNA量的0.08±0.03,0.11±0.06和0.20±0.06倍,干扰后虽然没有完全剔除MOS,但MOS量比同期卵母细胞有明显下降,仍可以引发成熟卵母细胞染色体解凝集。研究结果揭示了猪卵母细胞体外成熟及发育进程中c-mos基因在转录和翻译水平上的动态表达规律,建立了猪卵母细胞c-mos基因RNAi体系,为MOS在猪卵母细胞发育过程中的功能研究建立了重要的基础。

关 键 词:c-mos基因    卵母细胞  RNAi
修稿时间:2007-02-122007-06-19

Expression of c-mos gene and its RNAi in porcine oocyte
LIU Li-Qing,TIAN Jiang-Tian,GERILE Qimuge,SUN Shuang,ZHAO Xiang-Jie,Song Jun,ZHANG Yong-Fu,LI Yu-Tian,LIU Di,LIU Zhong-Hua.Expression of c-mos gene and its RNAi in porcine oocyte[J].Acta Zoologica Sinica,2007,53(4):717-724.
Authors:LIU Li-Qing  TIAN Jiang-Tian  GERILE Qimuge  SUN Shuang  ZHAO Xiang-Jie  Song Jun  ZHANG Yong-Fu  LI Yu-Tian  LIU Di  LIU Zhong-Hua
Institution:1. College of Life Science, Northeast Agricultural University, Haerbin 150030, China 2. College of Animal Science and Technology, Northeast Agricultural University, Haerbin 150030, China 3. Farming Center of Academy of Agriculture Sciences of Heilongjiang Province, Haerbin 150030, China
Abstract:
Keywords:c-mos gene  Porcine  Oocyte  RNAi
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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