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黑鲷生长激素放射受体分析法的建立及其受体组织的分布
引用本文:邓利,张为民,林浩然,郑汉其.黑鲷生长激素放射受体分析法的建立及其受体组织的分布[J].动物学报,2002,48(2):270-276.
作者姓名:邓利  张为民  林浩然  郑汉其
作者单位:1. 中山大学水生经济动物研究所,广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广州,510275
2. 香港中文大学生物化学系,香港沙田
基金项目:国家自然科学基金,39970586,
摘    要:利用黑棘鲷 (Acanthopagrusbutcheri)生长激素 (brGH )作为配体 ,建立了黑鲷 (Sparusmacrocephalus)生长激素受体放射受体分析法 (RadioreceptorAssay ,RRA)并分析其组织分布特征。在 2 5℃下 ,12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结合具有如下特点 :(1)时间依赖性 特异性结合达最大结合量一半的时间 (Ta1/ 2 )为 10 4h ,结合达到平衡状态需 2 0h ;激素 受体复合物的解离在 3h之内最快 ,2 4h后仅解离约40 % ,表明激素 -受体复合物的结合仅具部分可逆转性 ;(2 )可饱和性 12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结合随着膜蛋白浓度或12 5I brGH加入量的上升而呈逐渐上升并达到饱和状态的趋势 ;(3)可取代性 12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结合可被非标记brGH竞争性地取代 ,将特异性结合取代 5 0 % (ED50 )所需非标记brGH约为 3 8ng ,非标记重组金鱼生长激素 (rgfGH)及人生长激素 (hGH)对12 5IbrGH的竞争性取代能力明显较brGH低 ,而重组金鱼催乳素 (rgfPRL)、羊催乳素 (oPRL)在该系统中几乎无交叉反应。Scachard作图分析表明黑鲷肝细胞膜蛋白存在brGH单一的高亲和结合位点 ,Ka为 (3 49± 0 2 4)× 10 10 (mol/L) -1,Bmax为 146 8± 10 6fmol/mgprotein。结果表明 ,brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的

关 键 词:黑鲷  生长激素  放射受体分析法  受体  组织分布

ESTABLISHMENT OF RADIORECEPTOR ASSAY FOR BLACK SEABREAM (SPARUS MACROCEPHALUS) GH RECEPTOR AND ITS TISSUE DISTRIBUTION
Abstract:
Keywords:Black seabream (  Sparus macrocephalus  )  Radioreceptor assay  GH receptor  Tissue distribution
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