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| 工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-lac2)的构建及诱导表达漆酶的研究 | |
| 引用本文： | 沈锦城,张泽华,杨穗珊,张添元,罗进贤,张爱联.工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-lac2)的构建及诱导表达漆酶的研究[J].工业微生物,2013,43(1):36-40. |
| 作者姓名： | 沈锦城 张泽华 杨穗珊 张添元 罗进贤 张爱联 |
| 作者单位： | 1. 海南大学农学院,海口570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海口571101 2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海口,571101 3. 中山大学基因工程教育部重点实验室生物化学系,广州,510275 |
| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目 |
| 摘 要： | 用PCR法扩增枯草芽孢杆菌的漆酶基因lac2.构建表达质粒pPIC9K-lac2.通过电转法将lac2基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性和高表达漆酶的转化子作为工程菌GS115(pPIC9K-lac2).在发酵罐中发酵GS115(pPIC9K-lac2)表达重组蛋白.在50 L发酵罐中加入20 L无机盐发酵培养基.在发酵的第一阶段连续24 h补加50％甘油-0.8％ PTM4增殖P.pastoris,然后用甲醇-0.8％ PTM4诱导49 h.在发酵过程中,通过调节搅拌的频率和通气量,将溶氧维持于20％ ～30％,用氨水维持pH 5.0.放罐时生物量为A600=266.5,表达漆酶1097.5U/L发酵液. |
| 关 键 词： | 漆酶 枯草芽孢杆菌 基因表达 P.pastoris 发酵 高密度发酵 |
Expression of laccase lac2 gene of Bacillus subtilis in P.pastoris by high-density cell culture |
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| SHEN Jin-cheng , ZHANG Ze-hua , YANG Sui-shan , ZHANG Tian-yuan , LUO Jin-xian , ZHANG Ai-lian.Expression of laccase lac2 gene of Bacillus subtilis in P.pastoris by high-density cell culture[J].Industrial Microbiology,2013,43(1):36-40. | |
| Authors: | SHEN Jin-cheng ZHANG Ze-hua YANG Sui-shan ZHANG Tian-yuan LUO Jin-xian ZHANG Ai-lian |
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| Keywords: | |
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