| 鼠源抗人乳腺癌MRP1/ABCC1噬菌体Fab抗体库的构建 |
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| 引用本文： | 张学梅,赵彩红,李俊,罗晓,蒋葵.鼠源抗人乳腺癌MRP1/ABCC1噬菌体Fab抗体库的构建[J].生命科学研究,2014(4):338-343. |
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| 作者姓名： | 张学梅 赵彩红 李俊 罗晓 蒋葵 |
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| 作者单位： | 大连大学医学院;大连医科大学附属第二医院肿瘤科; |
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| 基金项目： | “十一五”国家科技支撑计划项目(2009BAK61B04) |
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| 摘 要： | 鼠源抗人乳腺癌多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1/ABCC1)噬菌体Fab抗体库的构建首先是利用乳腺癌组织匀浆液作为免疫原免疫BALB/c小鼠,成功免疫后提取小鼠脾组织的总RNA逆转录为cDNA。然后设计小鼠IgG各亚型的特异性Fab引物,PCR扩增Fd和L基因并依次连接到噬菌体载体pComb3中。重组体pComb3-Fab转化至E.coli XL1-Blue菌中,最后经辅助噬菌体VCSM13超感染,成功构建噬菌体Fab抗体库。以化学合成的MRP1/ABCC1膜表位10肽为抗原进行3轮淘选、富集,对淘选后获得的各级噬菌体抗体库进行ELISA检测和鉴定。成功获得的抗MRP1/ABCC1-10肽三级噬菌体Fab抗体库将为抗人乳腺癌MRP1/ABCC1 Fab抗体的制备提供保障。
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| 关 键 词： | Fab抗体 多药耐药相关蛋白1(MRP1/ABCC1) 乳腺癌 |
Construction of a Murine Phage Fab Library Against MRP1/ABCC1 of Human Breast Carcinoma |
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