| β分泌酶RNA干扰质粒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 潘岩,朱文斌,陈雪梅,徐运.β分泌酶RNA干扰质粒的构建与鉴定[J].生命科学研究,2007,11(3):200-205. |
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| 作者姓名： | 潘岩 朱文斌 陈雪梅 徐运 |
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| 作者单位： | 1. 南京大学,医学院,附属鼓楼医院,神经内科,中国江苏,南京,210008;南京大学,生物医药国家重点实验室,中国江苏,南京,210008
2. 南京大学,医学院,附属鼓楼医院,神经内科,中国江苏,南京,210008 |
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| 摘 要： | 选择人、小鼠和大鼠的BACEI基因的共有序列为干扰的靶标，设计4对干扰片段连接至带有GFP和U6 RNA聚合酶启动子的PRNATU6．1载体．将构建好的质粒转染HEK293T细胞，通过RT-PCR和Western blotting的方法分别在RNA和蛋白水平上来检测BACEI和Aβ，以鉴定其干扰效率，并通过夹心ELISA的方法进一步在过表达蛋白APP和BACE1的HEK293T细胞体系中验证干扰质粒对Aβ1-42生成的影响．RT-PCR和Western blotting结果提示β分泌酶的siRNA能干扰BACE1和Aβ RNA和蛋白水平表达，效率分别达到90％和80％．Westem blotting和ELISA结果提示，β分泌酶的siRNA也降低Aβ1-42生成．
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| 关 键 词： | Alzheimer's病 β分泌酶 β淀粉样肽 |
| 文章编号： | 1007-7847（2007）03-0200-06 |
| 修稿时间： | 2007-07-12 |
Construction and Identification of Small Interfering RNA Plasmid Specific for BACE in vitro |
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| PAN Yan,ZHU Wen-bin,CHEN Xue-mei,XU Yun.Construction and Identification of Small Interfering RNA Plasmid Specific for BACE in vitro[J].Life Science Research,2007,11(3):200-205. |
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| Authors: | PAN Yan ZHU Wen-bin CHEN Xue-mei XU Yun |
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| Institution: | 1. Department of Neurology,the Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University, Nanjing 210008, Jiangsu, China; 2. The State Key Laboratory of Pharmaceutical Bioteehnology, Nanjing University, Nanjing 210008, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNAi |
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