| 草鱼促性腺激素基因的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 王艳杰,刘琼,陈文娟,周毅,刘少军,李建中.草鱼促性腺激素基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J].生命科学研究,2013(4):321-324. |
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| 作者姓名： | 王艳杰 刘琼 陈文娟 周毅 刘少军 李建中 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31272261;31072199);留学回国人员科研启动基金资助项目(教外司留(2011)1568号) |
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| 摘 要： | 选用原核表达载体pGEX-4T-1,分别插入草鱼GTH和FSHβ的cDNA序列,构建成N端含有GST融合蛋白标签的表达质粒,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达出2个融合蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示重组融合蛋白GST-GTHα和GST-FSHβ的相对分子质量大约为35、38 kD.用抗GST标签的单克隆抗体分别对2个表达蛋白进行Western blot鉴定,结果显示重组蛋白表达正确.利用制备型SDS-PAGE纯化回收的蛋白并免疫新西兰大白兔,分别制备了抗GTH和抗FSHβ的具有较高效价的多克隆抗体.该结果为纯化天然GTH蛋白提供了有效的检测手段,也为进一步制备GTH单克隆抗体奠定了基础.
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| 关 键 词： | 草鱼 促性腺激素 基因克隆 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibody of Gonadotropins in Ctenopharyngodon idella |
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| WANG Yan-jie;LIU Qiong;CHEN Wen-juan;ZHOU Yi;LIU Shao-jun;LI Jian-zhong.Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibody of Gonadotropins in Ctenopharyngodon idella[J].Life Science Research,2013(4):321-324. |
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| Authors: | WANG Yan-jie;LIU Qiong;CHEN Wen-juan;ZHOU Yi;LIU Shao-jun;LI Jian-zhong |
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| Institution: | WANG Yan-jie;LIU Qiong;CHEN Wen-juan;ZHOU Yi;LIU Shao-jun;LI Jian-zhong;College of Life Sciences, Hunan Normal University; |
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