| 人成骨蛋白成熟肽基因在毕氏酵母(Pichia Yeast)中的高效表达 |
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| 引用本文： | 王忠泽,王慧,荫俊.人成骨蛋白成熟肽基因在毕氏酵母(Pichia Yeast)中的高效表达[J].生命科学研究,2002(Z1). |
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| 作者姓名： | 王忠泽 王慧 荫俊 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所，军事医学科学院微生物流行病研究所，军事医学科学院微生物流行病研究所 中国北京 100071，中国北京 100071，中国北京 100071 |
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| 基金项目： | 全军医药卫生科研基金资助项目（01MB059） |
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| 摘 要： | 采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白（osteogenic protein-1,OP-1）成熟肽基因序列,设计并合成一对引物,从构建的含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小为420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞,经鉴定的阳性重组质粒并线形化,电转化毕氏酵母细胞GS115,于30℃进行甲醇诱导分泌表达,表达产物存在于培养基中,占分泌蛋白的10％.重组表达产物进行Western Blot可以检测到重组表达产物,ELISA检测其具有特异性结合活性.
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| 关 键 词： | 人成骨蛋白 成熟肽 基因克隆 基因表达 毕氏酵母 |
High-level Expression of Mature Peptide Gene of Human OP-1 in Pichia Yeast |
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| WANG Zhong-ze,WANG Hui,YIN Jun.High-level Expression of Mature Peptide Gene of Human OP-1 in Pichia Yeast[J].Life Science Research,2002(Z1). |
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| Authors: | WANG Zhong-ze WANG Hui YIN Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human OP-1 mature peptide gene clone gene expression Pichia Yeast |
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