人β防御素3在大肠杆菌中可溶性表达及其生物活性的鉴定 |
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引用本文: | 黄蓬亮,赵亚华,许少鹏.人β防御素3在大肠杆菌中可溶性表达及其生物活性的鉴定[J].生命科学研究,2005,9(2):129-133. |
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作者姓名: | 黄蓬亮 赵亚华 许少鹏 |
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作者单位: | 华南农业大学,生命科学学院,中国,广东,广州,510640 |
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基金项目: | 广东省自然科学基金资助项目(980174) |
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摘 要: | 根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏好,设计引物并通过酶促法合成了人β防御素3(hBD-3)全基因序列,克隆进pGEX-4T-2中构建pGEX-4T-2-hBD-3融合表达载体.将表达载体转化Ecoli宿主菌DH5α,进行IPTG诱导表达.控制诱导条件,提高可溶性蛋白的表达量.将菌体进行反复冻溶使细胞膜穿孔,释放可溶性蛋白.融合蛋白GST-hBD-3经凝血酶切割得到重组人防御素蛋白.用琼脂孔穴扩散抑菌法检测表明,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抑菌活性.
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关 键 词: | hBD-3 融合表达 反复冻融 |
文章编号: | 1007-7847(2005)02-0129-05 |
修稿时间: | 2004年12月2日 |
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