草鱼CD8α和CD207的表达及抗细菌免疫的功能研究 |
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引用本文: | 田丁,蒋飞,陈春秀,李珂珂,卞柄杰,吴志新,陈孝煊.草鱼CD8α和CD207的表达及抗细菌免疫的功能研究[J].水生生物学报,2023,47(4):609-616. |
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作者姓名: | 田丁 蒋飞 陈春秀 李珂珂 卞柄杰 吴志新 陈孝煊 |
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作者单位: | 1. 华中农业大学水产学院;2. 湖北省水生动物病害防控工程技术研究中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31972819)资助~~; |
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摘 要: | 为探讨树突状细胞(Dendritic cells, DCs)表面重要的表型分子CD8α和CD207在草鱼(Ctenopharyngodon idella) DCs抗细菌免疫应答中的作用,实验从草鱼DCs的cDNA中扩增CD8α和CD207胞外区,构建重组表达质粒pET-32a-CD8α/CD207,并转化到感受态细胞Transetta (DE3),表达纯化后制备CD8α和CD207多克隆抗体。利用qPCR、Western Blot及流式细胞术揭示草鱼CD8α和CD207在抗细菌免疫过程中发挥的功能。结果显示,制备的草鱼CD8α和CD207多克隆抗体既可以识别原核表达的重组蛋白,也能识别鱼体内和培养细胞的内源性蛋白。从功能上看,灭活嗜水气单胞菌处理草鱼DCs后,在24h内, CD8α和CD207的表达量均有显著上调(P<0.05);且CD8α和CD207分子在草鱼DCs呈递抗原刺激混合淋巴细胞增殖这一过程中发挥重要作用。因此,草鱼DCs表现出与哺乳动物相似的保守免疫表型和功能,研究结果为阐明草鱼DCs介导的适应性免疫调节机制奠定基础。
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关 键 词: | 树突状细胞 CD8α CD207 抗原呈递 抗细菌免疫 草鱼 |
收稿时间: | 2021-09-16 |
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