| 嗜水气单胞菌外毒素和外膜蛋白双基因融合表达载体的构建和高效表达 |
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| 引用本文： | 何鸣筱,叶巧真,陈诚,谢俊锋,何建国.嗜水气单胞菌外毒素和外膜蛋白双基因融合表达载体的构建和高效表达[J].水生生物学报,2004,28(2):169-173. |
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| 作者姓名： | 何鸣筱 叶巧真 陈诚 谢俊锋 何建国 |
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| 作者单位： | 中山大学生命科学学院,广州,510275 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助 (No .3 0 0 0 0 12 8) |
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| 摘 要： | 用基因融合方式 ,以嗜水气单胞菌基因组DNA为模板 ,设计引物通过聚合酶链式反应 (PCR)把去除部分毒性活性编码区的细胞毒肠毒素基因 (act)与去除信号肽的外膜蛋白基因 (OmpTS)连接一起 ,两基因之间插入一个link er(Gly4Ser) 3 经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,得到 2 .1kb的双基因融合片段 ,克隆于表达质粒pQE 30中 ,构建了双基因重组表达载体pQE30 /act GS ompTS ,转化大肠杆菌M15 (pREP4 ) ,经IPTG诱导 ,表达出预期大小 (81.0kD)的融合蛋白Act GS OmpTS ,此蛋白占菌体总蛋白的 4 2 %。Westernblot检测结果显示 ,该蛋白与抗Act兔血清和抗OmpTS兔血清都呈阳性反应 ,表明融合蛋白保留了外毒素和外膜蛋白的反应原性 ,为进一步研究此融合蛋白作为疫苗候选成分提供了理论依据
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 细胞毒肠毒素基因 外膜蛋白基因 融合基因表达 |
| 文章编号： | 1000-3207(2004)02-0169-05 |
| 修稿时间： | 2002年12月10 |
CONSTRUCTION AND HIGH EXPRESSION OF AN act-OmpTS FUSION VECTOR OF AEROMONAS HYDROPHILA |
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| HE Ming-Xiao,YE Qiao-Zhen,CHEN Cheng,XIE Jun-Feng and HE Jian-Guo.CONSTRUCTION AND HIGH EXPRESSION OF AN act-OmpTS FUSION VECTOR OF AEROMONAS HYDROPHILA[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2004,28(2):169-173. |
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| Authors: | HE Ming-Xiao YE Qiao-Zhen CHEN Cheng XIE Jun-Feng and HE Jian-Guo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas hydrophila Cytotoxic enterotoxin act gene Outer membrane protein ompTS gene Fusion gene expression |
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