| 中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究 |
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| 引用本文： | 黄小红,陈宏惠,黄一帆.中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究[J].水生生物学报,2007,31(4):1-569. |
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| 作者姓名： | 黄小红 陈宏惠 黄一帆 |
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| 作者单位： | 福建农林大学动物科学学院动物保健研究所,福州,350002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;福建省教育厅科研项目 |
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| 摘 要： | 本研究以中华绒螯蟹内脏为材料,经过硫酸铵沉淀分级分离、两次DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为4490.79U/mg、纯化倍数为28.07倍的聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂。酶分子中各亚基的分子量分别为121.219、8.63和73.48 kD,等电点为4.5。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,进行酶催化底物水解的反应动力学研究,结果表明：酶催化底物反应的最适pH为5.5,最适温度为45℃。该酶在pH4.9—9.3区域或40℃以下处理30min,酶活力保持稳定。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.357 mmol/L,最大反应速度Vm为10.41μmol/L.min。酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为76.50kJ/mol。金属离子对酶的效应试验表明：Mg^2＋、Ca^2＋和Ba^2＋对酶活力没有影响。Na＋对酶有激活作用,Li^＋、K^＋、Zn^2＋、Hg^2＋、Pb^2＋、Cu^2＋和Al3＋对酶活力表现出不同程度的抑制作用。
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| 关 键 词： | 中华绒螯蟹 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 动力学 稳定性 |
| 文章编号： | 1000-3207（2007）04-0563-07 |
| 修稿时间： | 2006-06-212007-03-17 |
PRELIMINARY STUDIES ON ISOLATION,PURIFICATION AND SOME PROPERTIES OF THE β-N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE FROM ERIOCHEIR SINENSIS |
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| HUANG Xiao-Hong,CHEN Hong-Hui,HUANG Yi-Fan.PRELIMINARY STUDIES ON ISOLATION,PURIFICATION AND SOME PROPERTIES OF THE β-N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE FROM ERIOCHEIR SINENSIS[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2007,31(4):1-569. |
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| Authors: | HUANG Xiao-Hong CHEN Hong-Hui HUANG Yi-Fan |
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| Institution: | Institute of Animal Health, College of Animal Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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