| 斑节对虾溶菌酶基因克隆及序列分析 |
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| 引用本文： | 郑清梅,叶星,白俊杰,吴锐全,罗建仁.斑节对虾溶菌酶基因克隆及序列分析[J].水生生物学报,2004,28(4):413-417. |
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| 作者姓名： | 郑清梅 叶星 白俊杰 吴锐全 罗建仁 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州,510380 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助 (No.2 0 0 10 673 ) |
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| 摘 要： | 参考对虾溶菌酶基因和类溶菌酶基因及其他多种生物的溶菌酶基因序列 ,设计并合成引物。运用RT PCR技术 ,从斑节对虾血细胞总RNA中扩增获得特异性片段。所获片段回收纯化后克隆到pGEM TEasyVector系统的T载体上。重组子的序列分析表明 ,所克隆的斑节对虾溶菌酶基因片段长 6 5 8bp ,包括溶菌酶基因开放阅读框 (ORF)4 77bp和 3′端非编码区的 181bp。 4 77bpORF共编码 15 8个氨基酸 ,包括溶菌酶成熟肽 14 0个氨基酸残基和信号肽 18个氨基酸残基。斑节对虾溶菌酶成熟肽推测分子量为 16 ,32kd ,等电点为 8 78。与南美白对虾溶菌酶基因的碱基序列及推测氨基酸序列比较 ,同源性分别为 89 5 %和 93 0 % ;与日本对虾类溶菌酶基因的同源性分别为 84 0 %和91 0 %。进一步的序列分析表明 ,斑节对虾溶菌酶氨基酸序列与多种类群生物的c 型溶菌酶氨基酸序列具有较高的同源性 ,并具有与c 型溶菌酶相同的活性位点氨基酸残基Glu51和Asp68,且与活性位点相邻的序列高度保守。斑节对虾溶菌酶氨基酸序列还具有与c 型溶菌酶相同的结构氨基酸——— 8个半胱氨酸残基。因而可认为所克隆的斑节对虾溶菌酶基因属c 型溶菌酶基因。
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| 关 键 词： | 斑节对虾 溶菌酶 克隆 序列分析 |
| 文章编号： | 1000-3207(2004)04-0413-05 |
| 修稿时间： | 2002年12月10 |
ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF THE LYSOZYME-ENCODING GENE FROM THE BLACK TIGER SHRIMP,PENAEUS MONODON |
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| ZHENG Qing-Mei,YE Xing,BAI Jun-Jie,WU Rui-Quan and LUO Jian-Ren.ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF THE LYSOZYME-ENCODING GENE FROM THE BLACK TIGER SHRIMP,PENAEUS MONODON[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2004,28(4):413-417. |
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| Authors: | ZHENG Qing-Mei YE Xing BAI Jun-Jie WU Rui-Quan and LUO Jian-Ren |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Penaeus monodon Lysozyme Molecular cloning Characterization |
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