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| 中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因全长cDNA克隆和重组表达 | |
| 引用本文： | 孙妍,张亦陈,刘逸尘,王雪惠,王宇凡,耿绪云,孙金生,杨卫军.中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因全长cDNA克隆和重组表达[J].水生生物学报,2011,35(2):210-217. |
| 作者姓名： | 孙妍 张亦陈 刘逸尘 王雪惠 王宇凡 耿绪云 孙金生 杨卫军 |
| 作者单位： | 1. 天津师范大学生命科学学院,天津,300387;天津市水产养殖病害防治中心,天津,300221 2. 天津师范大学生命科学学院,天津,300387 3. 天津市水产养殖病害防治中心,天津,300221 4. 浙江大学生命科学学院,杭州,310058 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30571421、30871907); 天津市应用基础及前沿技术研究项目(10JCZDJC18200、09JCYBJC15000、10JCYBJC09200); 国家科技支撑计划项目(2006BAD09A11); 天津市高等学校科技发展基金计划项目(20080618); 天津师范大学博士基金项目(52LX18119)资助 |
| 摘 要： | 根据实验室分离自中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的一种蜕皮抑制激素(Molting-inhibiting hormone,MIH)N端氨基酸测序结果设计简并引物,采用RACE方法,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆到蜕皮抑制激素基因全长cDNA(Es-MIH,GenBank登录号:DQ341280),该基因全长为1457 bp,开放阅读框为330 bp,编码110个氨基酸(含有35个氨基酸的信号肽);其成熟肽包含C7-C44、C24-C40和C27-C53三个二硫键,有典型的CHH家族结构域。该cDNA编码的氨基酸序列与地蟹(Gecarcinus lateralis)MIH同源性最高,达到了85%。Northern杂交和半定量RT-PCR显示蜕皮间期成体蟹仅在眼柄中有MIH基因表达,提示该基因的表达具有一定组织特异性。利用pCR T7/NT TOPO TA系统重组表达MIH成熟肽,纯化的重组蛋白得率为0.3 g/L,纯化产物经质谱鉴定为中华绒螯蟹MIH。研究解决了CHH家族神经肽在机体中的表达量少,直接纯化较难的问题,为深入研究MIH的作用机制和在生产上控制中华绒螯蟹蜕皮和生长奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 中华绒螯蟹 蜕皮抑制激素基因 组织表达 重组表达 纯化 |
CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF MOLT-INHIBITING HORMONE GENE (Es-MIH) IN ERIOCHEIR SINENSIS |
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| SUN Yan,ZHANG Yi-Chen,LIU Yi-Chen,WANG Xue-Hui,WANG Yu-Fan,GENG Xu-Yun,SUN Jin-Sheng,YANG Wei-Jun.CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF MOLT-INHIBITING HORMONE GENE (Es-MIH) IN ERIOCHEIR SINENSIS[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2011,35(2):210-217. | |
| Authors: | SUN Yan ZHANG Yi-Chen LIU Yi-Chen WANG Xue-Hui WANG Yu-Fan GENG Xu-Yun SUN Jin-Sheng YANG Wei-Jun |
| Institution: | SUN Yan1,2,ZHANG Yi-Chen1,LIU Yi-Chen1,WANG Xue-Hui2,WANG Yu-Fan1,GENG Xu-Yun2,SUN Jin-Sheng1,2 and YANG Wei-Jun3(1.College of Chemistry and Life Science,Tianjin Normal University,Tianjin 300387,China,2.Tianjin Aquaculture Disease Pre-vention & Treatment Center,Tianjin 300221,3.College of Life Science,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China) |
| Abstract: | Periodic molting is essential for growth and development in crustaceans.Molting is triggered by steroid hormones(ecdysteroids) which secreted by paired endocrine glands,the Y-organs.The synthesis of ecdysteroids by Yorgans is negatively regulated by a peptide neurohormone,moltinhibiting hormone(MIH),a polypeptide neurohor-mone released from neurosecretory cells in the X-organ/sinus gland complex of the eyestalks.To clone a full length cDNA of molt-inhibiting hormone gene from Eriocheir sinensis by RACE-PCR,... |
| Keywords: | Eriocheir sinensis Molt-inhibiting hormone Cloning Expression profile Prokaryotic expression |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |