| 斑马鱼ints12的CRISPR/Cas9敲除及其对UsnRNA剪接的调控 |
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| 引用本文： | 黄思雨,何牡丹,王厚鹏,孙永华.斑马鱼ints12的CRISPR/Cas9敲除及其对UsnRNA剪接的调控[J].水生生物学报,2019,43(1):1-8. |
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| 作者姓名： | 黄思雨 何牡丹 王厚鹏 孙永华 |
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| 作者单位： | 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室;中国科学院大学现代农业科学学院 |
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| 摘 要： | 整合因子(Integrator)复合体通过调控UsnRNAs(U-rich small nuclear RNAs)的转录成熟过程, 影响pre-mRNA的内含子剪切, 对生物体内形成成熟mRNA有重要作用。但是在脊椎动物中, 整合因子复合体的表达调控及其发育功能研究尚十分缺乏。研究利用斑马鱼(Danio rerio)模型, 通过CRISPR/Cas9技术构建了ints12 (Integrator subunit 12)的基因敲除品系, 得到了2种缺失不同碱基的突变品系。在ints12的合子突变体(Zints12)中, 通过荧光定量PCR分析, 发现UsnRNA的3′box剪切存在缺陷。与同龄的野生型斑马鱼相比, Zints12体型偏小且表现为全雄。进一步研究发现, 在Zints12成体中, 细胞增殖相关因子出现显著下调表达, ints12自身pre-mRNA的加工也出现内含子滞留, 表明ints12对自身mRNA的剪切存在一个“自循环”式的调控模式。研究获得了斑马鱼的ints12基因敲除纯合突变体并发现ints12通过调控UsnRNA的剪切参与斑马鱼的个体生长和发育。
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| 关 键 词： | ints12 CRISPR/Cas9 UsnRNA mRNA加工 |
| 收稿时间： | 2018-03-26 |
CRISPR/CAS9-MEDIATED KNOCKOUT OF INTS12 IN ZEBRAFISH AND THE REGULATION OF INTS12 ON USNRNA PROCESSING |
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