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大鲵铁蛋白重链FTH基因的克隆、鉴定及表达分析
引用本文:杨辉,李锋刚,蓝青景,胡伟,刘小林,王立新.大鲵铁蛋白重链FTH基因的克隆、鉴定及表达分析[J].水生生物学报,2014,38(1):27-34.
作者姓名:杨辉  李锋刚  蓝青景  胡伟  刘小林  王立新
作者单位:1. 西北农林科技大学动物科技学院, 杨凌 712100;
2. 陕西省农业分子生物学重点实验室, 杨凌 712100
基金项目:陕西省科技攻关(2012K01-18);西北农林科技大学基本科研业务费专项(QN2011062);西北农林科技大学后稷学者支撑计划(Z11021007)资助
摘    要:从大鲵皮肤cDNA文库中,筛选出大鲵铁蛋白重链AdFTH的cDNA序列,其全长为864 bp,开放阅读框为531 bp,编码176个氨基酸,5′和3′非翻译编码区(Untranslated region,UTR)分别为120 bp和214 bp,预测蛋白质的分子量为20.6 kD,理论等电点PI为5.41,预测蛋白无信号肽及跨膜结构,在5′-UTR的22—51 bp处有一个特殊的铁反应元件(Iron response element,IRE)。同源性和系统进化分析表明,铁蛋白重链在进化上有着较高的保守性。实时定量PCR结果表明,大鲵铁蛋白重链mRNA在各个组织中广泛表达,其中肝脏的表达量高于其他8种组织,表明肝脏是大鲵主要的参与铁储存代谢的器官。成功构建了大鲵铁蛋白重链的重组表达载体pET32a-AdFTH,利用大肠杆菌Escherichia coli BL21表达系统和Ni2+亲和层析方法,获得了纯度较高的重组大鲵铁蛋白,并证实重组大鲵铁蛋白(Recombinant AdFTH protein,rAdFTH)具有氧化和吸收铁离子的功能,为进一步制备AdFTH抗体了解其在大鲵体内的多种作用机制打下坚实的基础。

关 键 词:大鲵  铁蛋白重链  序列分析  原核表达  组织分布
收稿时间:2012-10-08

CLONING,IDENTIFICATION AND EXPRESSION OF FERRITIN HEAVY CHAIN FROM CHINESE GIANT SALAMANDERS,ANDRIAS DAVIDIANUS
Yang Hui,Li Feng-Gang,Lan Qing-Jing,Hu Wei,Liu Xiao-Lin,Wang Li-Xin.CLONING,IDENTIFICATION AND EXPRESSION OF FERRITIN HEAVY CHAIN FROM CHINESE GIANT SALAMANDERS,ANDRIAS DAVIDIANUS[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2014,38(1):27-34.
Authors:Yang Hui  Li Feng-Gang  Lan Qing-Jing  Hu Wei  Liu Xiao-Lin  Wang Li-Xin
Institution:1. College of Animal Sciences, Northwest A&F University, Yangling 712100, China;
2. Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture, Yangling 712100, China
Abstract:
Keywords:
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