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miRNA干扰口蹄疫病毒基因组早期复制的初步研究
引用本文:袁婷婷,熊义,纪怡冰,郑从义,屈三甫,李勇,黄旋.miRNA干扰口蹄疫病毒基因组早期复制的初步研究[J].氨基酸和生物资源,2009,31(2):50-55.
作者姓名:袁婷婷  熊义  纪怡冰  郑从义  屈三甫  李勇  黄旋
作者单位:武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),国家基础科学理科人才培养资助项目 
摘    要:根据miRNA的设计要求,以miR-31为模型通过软件设计出潜在的能够使3D基因沉默的特异性miRNA序列3D-1203,并以pcDNA3.1(+)质粒为载体构建能够表达成熟miRNA的重组质粒,将其转染到BHK-21细胞后感染口蹄疫病毒,研究3D-1203的miRNA的干扰作用。蚀斑实验结果显示特异性miRNA可以在早期抑制口蹄疫病毒的复制,与阳性对照相比,病毒复制效率降低53.0%。实时TaqMan荧光定量RT-PCR检测数据表明特异性miRNA干扰病毒基因组增殖的效率达66.7%。本研究证明,利用miR-31设计的特异性miRNA在病毒复制早期能够特异的干扰口蹄疫的复制。

关 键 词:蚀斑  实时TaqManRT-PCR  口蹄疫病毒  miRNA

Primary Study on the Early Replication of FMDV Using miRNA Interference
YUAN Ting-ting,XIONG Yi,JI Yi-bing,ZHENG Cong-yi,QU San-fu,LI Yong,HUANG Xuan.Primary Study on the Early Replication of FMDV Using miRNA Interference[J].Amino Acids & Biotic Resources,2009,31(2):50-55.
Authors:YUAN Ting-ting  XIONG Yi  JI Yi-bing  ZHENG Cong-yi  QU San-fu  LI Yong  HUANG Xuan
Institution:(State Key Laboratory of Virology, College of Life Science, Wuhan University, Wuhan 430072, China)
Abstract:To obtain the potential miRNA,we designed the potential target sequence of 3D gene based on the model of miRNA-31 and constructed the special miRNA 3D-1203 expression plasmid.BHK-21 cells were transfected with plasmid p3D-1203 and infected by foot-and-mouth disease virus(FMDV).Plaque assays showed that the special miRNA could reduce the virus titer of FMDV in cells transfected with p3D-1203 to 53.0% compared with normal BKH-21.The result of Real-Time TaqMan RT-PCR conformed that the special miRNA suppressed the replication of FMDV at a level of 66.7%.Those data demonstrated that special miRNA could dramatically inhibit the replication of FMDV in BHK-21 cell in an early stage.
Keywords:miRNA
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