半胱氨酸合成酶与β-氰基丙氨酸合成酶活性检测 |
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引用本文: | 焦成瑾,赵菲佚,谢尚强,袁毅君,杨玲娟.半胱氨酸合成酶与β-氰基丙氨酸合成酶活性检测[J].氨基酸和生物资源,2014,36(4):66-72. |
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作者姓名: | 焦成瑾 赵菲佚 谢尚强 袁毅君 杨玲娟 |
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作者单位: | 天水师范学院生物工程与技术学院,甘肃天水,741001;天水师范学院化学工程与技术学院,甘肃天水,741001 |
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摘 要: | 植物半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CSase)和β-氰基丙氨酸合成酶(β-cyanoalanine synthase,β-CAS)分别催化合成半胱氨酸(Cysteine,Cys)和β-氰基丙氨酸(β-Cyanoalanine,β-CA),它们在功能上冗余。本研究以山黧豆、苜蓿和玉米为主要材料,结合电泳对8种常见植物CSase和β-CAS粗酶活性进行了分析。结果表明,检测CSase活性时,8种植物两类粗酶的最适反应时间均为10min,最适pH均为8.0,底物O-乙酰-丝氨酸和Na2S最适浓度分别是10和5 mmol·L-1。检测β-CAS活性时,8种植物两类粗酶的最适反应时间均为30min,最适pH均在9~10范围内,底物Cys最适浓度均为3mmol·L-1,而底物KCN最适浓度前者为80mmol·L-1,后者为3mmol·L-1。8种植物中,CSase活性在种、种内组织间差别不是很大,但β-CAS活性则相反,尤其在茎叶和根中差别较大。
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关 键 词: | L-半胱氨酸合成酶 β-氰基丙氨酸合成酶 酶活性 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
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