| 2,4-二硝基氟苯衍生法测定游离氨基酸方法的优化 |
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| 引用本文： | 张宏杰,周建军,李新生,吴三桥,李会宁.2,4-二硝基氟苯衍生法测定游离氨基酸方法的优化[J].氨基酸和生物资源,2000,22(4):59-62. |
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| 作者姓名： | 张宏杰 周建军 李新生 吴三桥 李会宁 |
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| 作者单位： | 陕西省资源生物重点实验室,陕西,汉中,723000 |
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| 基金项目： | 陕西省教育厅资助项目 |
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| 摘 要： | 以美国HPLC 110 0系列为基本实验设备 ,在流速为 1 0ml/min ,紫外检测器波长为 36 0nm ,运行时间 2 5min ,进样量为 10ul情况下 ,筛选了流动相梯度、2 ,4_二硝基氟苯用量、柱温 ,测定了回收率。结果表明 :FDBN衍生法分析游离氨基酸 ,流动相Ⅰ为 0 0 4NKH2 PO4 ( pH =7 2± 0 0 5 ,40 %KOH调整 )缓冲液 ;流动相Ⅱ为乙腈的水溶液 ,其浓度为 5 5 % ,流动相Ⅰ的百分比梯度为 86 / 0min— 88/ 2min— 86 / 4min— 70 / 10min— 30 / 2 0min— 10 / 2 1min— 0 / 2 4.0min ,1%FDBN用量为 5— 2 0ul,柱温 40℃ ,样品AA浓度大于 0 5nmol/ul,17种AA分离效果最佳。此方法AA回收率在10 0 %～ 10 4%之间。
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| 关 键 词： | 2 4-二硝基氟苯 氨基酸 测定方法 优化 |
Optimization for Determining Free Amin Acid with FDBN Method |
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| ZHANG Hong-jie,ZHOU Jian-jun,LI Xin-sheng,WU San-qiao,LI Hui-ning.Optimization for Determining Free Amin Acid with FDBN Method[J].Amino Acids & Biotic Resources,2000,22(4):59-62. |
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| Authors: | ZHANG Hong-jie ZHOU Jian-jun LI Xin-sheng WU San-qiao LI Hui-ning |
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| Abstract: | An optimal method for determining free amino acid derived with FDBN by using HPLC was reported here,The chromatography was run with 0.04M KH 2PO 4 and 55%of CH 3CN as mobilephase ,and an UV detector.It was found that the 17 amino acids could be separated with 100% 104% of reeovery when the column temperature was at 40℃ and the concentration of aa was higher than 0.5n mol·L 1 . |
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| Keywords: | FDBN Assay of amino acids Optinization |
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